目的：子宫内膜癌指原发于子宫内膜的一组上皮性恶性肿瘤，以来源于子宫内膜腺体的腺癌最常见，围绝经期及绝经后妇女多发。其作为女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一，发病率占女性全身恶性肿瘤的7%，女性生殖道恶性肿瘤的20%～30%。近年国外流行病学调查发现其发病率呈上升及年轻化趋势，但其病因及发病机制尚不明确。活检虽是目前诊断子宫内膜癌唯一的金标准，可它却是一项侵入性检查，所以我们急需一个可早期诊断子宫内膜癌的方法。microRNA是一类广泛存在于真核细胞中的长约22nt的单链非编码RNA，其通过与miRNA完全或不完全的互补使靶mRNA降解或抑制其翻译，从而调控靶基因的表达，影响细胞增殖、分化和凋亡。miRNA可通过类似癌基因、抑癌基因或其他方式调控肿瘤的发生、发展和转化过程。其中当属对miR-21的研究最为热门，目前研究发现其可能参与了细胞的分化、增殖和凋亡，与肿瘤的发生密切相关。P53是当今研究最为广泛的人类肿瘤抑制基因。P53蛋白与DNA多聚酶结合，可使复制起始复合物失活，从而抑制肿瘤细胞过度增殖。P53突变导致该基因过度表达，这种异常过度表达往往与子宫内膜癌临床分期、组织分级、肌层侵蚀度密切相关。本研究旨在通过观察抑制miR-21的表达后子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖与凋亡的情况，及其P53在子宫内膜癌Ishikawa细胞中的表达，并探讨二者在子宫内膜癌中的作用关系，以发现miRNA-21在子宫内膜癌发生、发展过程中的作用，为其诊断和治疗提供新的靶标。方法：1培养子宫内膜癌Ishikawa细胞株。2实验分组：①实验组即应用Lipofectamine2000脂质体转染试剂转染miR-21的特异性抑制剂反义寡核苷酸组；②阴性对照组即转染无关miR-21的特异性抑制剂核苷酸序列组；③脂质体对照组即转染Lipofectamine2000脂质体转染试剂组；④空白对照组即不转染组。3CCK-8法检测各组子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖情况。4流式细胞学方法检测各组子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡情况。5实时定量PCR检测各组子宫内膜癌Ishikawa细胞中miRNA21和P53mRNA的表达水平。6Western blot检测各组子宫内膜癌Ishikawa细胞中P53蛋白表达的情况。7用SPSS13.0统计软件对所有数据进行统计学分析。数据以均数±标准差(x±s)表示，两组间均数比较用t检验，多组间均数比较采用单因素方差分析，P<0.05为具有显著性差异。所有实验均重复3次。结果：1经Lipofectamine2000脂质体转染法转染24h、48h后，用激光共聚焦显微镜观察转染效率：24h后实验组及阴性对照组孔中均有弱荧光表达，48h后荧光表达均增强（转染率70%~85%）。2CCK-8法检测发现：四组细胞整体呈增殖趋势，0-24h，空白对照组和脂质体对照组增殖速度相似，比实验组和阴性对照组略快；24-48h，空白对照组、脂质体对照组和实验组增殖速度较快；48-72h，增殖速度：脂质体对照组＞空白对照组＞实验组＞阴性对照组；72-96h，四组细胞继续保持增殖状态，且达到对数生长期，空白对照组、脂质体对照组和实验组增殖速度稍快。各组之间比较无显著性差异(P>0.05)。3细胞转染3天后，流式细胞仪检测转染对细胞凋亡的影响：实验组与空白对照组、脂质体和阴性对照组比较早期凋亡所占的比例明显偏低，各组之间比较有显著性差异(P<0.05)。实验组与空白对照组、脂质体和阴性对照组比较晚期凋亡细胞所占比例相似，各组之间比较无显著性差异(P>0.05)。4实时定量PCR检测miRNA21和P53mRNA的表达水平：与空白对照组相比，实验组miR-21的表达量下调了40%左右，也明显低于其他各组，与各组间比较有显著性差异(P<0.05)。相对于空白对照组和脂质体对照组，实验组和阴性对照组P53mRNA的表达量明显降低，与各组间比较有显著性差异(P<0.05)。5通过Western Blot检测P53蛋白表达，实验组P53蛋白的表达量明显高于阴性对照组、空白对照组及脂质体对照组，并且与各组间比较有显著性差异(P<0.05)。结论：1子宫内膜癌Ishikawa细胞中有miR-21表达，miR-21抑制剂能有效抑制其在细胞中的表达。2miR-21能够促进子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡，而对细胞的增殖无明显影响。3P53蛋白在子宫内膜癌Ishikawa细胞中呈高表达。4在子宫内膜癌Ishikawa细胞中miR-21对P53基因的调控作用不明显，但能在转录后水平抑制P53蛋白的表达，从而影响子宫内膜癌的发生、发展及预后。