人脐带间充质干细胞对去卵巢大鼠阴道衰老萎缩影响及机制研究

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目的:  研究人脐带间充质干细胞对去卵巢后雌性Wistar大鼠衰老萎缩阴道组织的治疗效果,为绝经后妇女阴道萎缩的治疗提供新思路。初步研究探讨人脐带间充质干细胞治疗阴道衰老萎缩的作用机制,为人脐带间充质干细胞临床用于治疗阴道萎缩提供部分基础性依据。  方法:  40只雌性Wistar大鼠被随机分为4个组,分别命名为对照组,模型组、雌激素组及干细胞组。模型组、雌激素组及干细胞组大鼠的双侧卵巢被切除,对照组则只切除同等重量的脂肪组织。术后第5天开始进行连续阴道细胞涂片检查,每天检测1次,连续检测5天,显示一直是动情间期说明手术成功。再继续饲养动物15天(术后20天),观察阴道组织,确定模型是否成功。模型成功后,干细胞组予人脐带间充质干细胞悬液阴道局部注射,每周1次,连续治疗3周,雌激素组予雌三醇软膏阴道局部给药,每天1次,连续治疗3周,剩余2组正常饲养。  停止治疗后1周将大鼠处死取材。计算大鼠的阴道指数;检测阴道组织的SOD和MDA;对各组大鼠阴道组织包埋切片后进行HE染色,糖原染色以测定阴道黏膜厚度及上皮细胞内糖原含量;测定各组大鼠阴道组织角蛋白AE1/AE3的含量,测定阴道组织Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin,GSK-3β,TCF-3三种目标蛋白的含量。  结果:  1.干细胞治疗能增加阴道指数,改善阴道萎缩。与雌激素的治疗效果相当,与对照组相比无差异。  2.干细胞治疗能显著升高阴道组织SOD活性,降低MDA含量,抵抗阴道组织衰老。效果优于雌激素,超过对照组水平。  3.干细胞治疗能显著增加阴道黏膜厚度及上皮层厚度,改善阴道萎缩。与雌激素组及对照组相比无差异。  4.干细胞治疗能增加阴道黏膜上皮细胞内糖原含量,与模型组比有差异,雌激素组糖原含量最高。  5.干细胞治疗能增强阴道组织角蛋白AE1/AE3的表达,使阴道黏膜上皮细胞的数量增多,改善黏膜的萎缩。与雌激素组治疗效果相当,略低于对照组水平。  6.干细胞组的大鼠阴道组织β-catenin的表达增加,GSK-3β的含量下降与模型组比较有差异,TCF-3含量增多但与模型组比较差异不显著。  结论:  1.切除大鼠双侧卵巢是建立大鼠阴道黏膜萎缩模型的可靠方法。  2.人脐带间充质干细胞能有效地治疗去卵巢大鼠阴道衰老萎缩状态。  3.人脐带间充质干细胞发挥作用的机制可能是通过Wnt/β-catenin信号通路的激活。
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