论文部分内容阅读
目的:通过测定孕5-12周早孕妇女的血清PAPP-A水平及正常妊娠与自然流产绒毛组织中PAPP-A的表达,以明确妊娠相关血浆蛋白-A(pregnancy associated plasma protein-A,PAPP—A)与早期妊娠结局的相关性,为临床上先兆流产的保胎治疗提供依据。方法:1.病例资料1.1 ELISA分析血清PAPP-A选取2013年2月至2014年6月期间就诊我院遗传与优生门诊的孕5-12周早孕妇女79例,年龄l8-45岁,平均27岁,月经规律者以末次月经时间计算孕周,少数月经不规则的,经B超检查辅助确定孕周。其中27例患者出现先兆流产的症状,52例无先兆流产。随访至妊娠12周,以观察早期妊娠的结局。排除标准:患者孕期服药史、原发性高血压疾病、糖尿病、甲状腺功能亢进、有毒有害物质接触史、孕妇夫妻双方染色体异常、子宫畸形、内分泌异常以及免疫功能异常和感染等。1.2免疫组化法分析绒毛组织中PAPP-A分布及表达自然流产组(流产组):收取自然流产或胚胎停育(包括13例ELISA组流产的患者)孕妇流产清宫时绒毛组织33例作为流产组,-70℃保存备用。患者年龄22-35岁,平均年龄26岁。正常妊娠组(对照组):选择30例健康孕妇在我院同期自愿流产术的流产绒毛组织,作为对照组,-70℃保存备用。年龄23-32岁,平均26岁,以前有正常生育史,本次无阴道出血、下腹疼痛等症状。2.实验方法2.1酶联免疫吸附法(ELISA法):收集79例早孕妇女5ml空腹静脉血,离心,吸取上层血清,-70℃保存备用。选择酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清PAPP-A含量,进行PAPP-A水平测定。2.2免疫组化法:使用免疫组化法,分别测定流产组及对照组患者流产绒毛组织中PAPP-A的表达。3.统计学分析所有数据统计用软件处理。对79例早妊妇女血清中PAPP-A水平分析,采用t、χ2检验,并对流产组和对照组绒毛组织PAPP-A表达分析,采用t检验。以α=0.05为检验水准,P<0.05有统计学意义。结果:1.血清中PAPP-A水平①血清PAPP-A水平在早孕妇女中随着孕周的增大而升高。见表2-1、图2-1。②随访至妊娠12周,观察早期妊娠结局,在研究中的79例早孕妇女中,其中13例(16.46%)为异常妊娠(即自然流产、胚胎停止发育),B超见胎心且超声胎龄为12周者66例(83.54%)。见表2-3。③79例早孕妇女中,根据有无临床流产症状,分为有先兆流产症状的27例,无先兆流产症状的52例。有先兆流产症状的27例早孕妇女中,5例患者PAPP-A血值低于PAPP-A Mo M值(有3例最终发生流产,2例继续妊娠),22例PAPP-A血值正常者(其中5例最终发生流产,17例继续妊娠);无先兆流产症状患者52例,4例患者PAPP-A血值低于PAPP-A Mo M值(其中2例最终发生流产,2例继续妊娠),48例PAPP-A血值正常者(其中3例最终发生流产,45例继续妊娠)。见表2-2。2.绒毛组织形态学比较流产组与正常组绒毛组织HE染色,光学显微镜下观察:流产绒毛外合体滋养细胞明显减少,成大片状融合,内层细胞滋养细胞增生、在细胞数量上有所增加;间质细胞发生纤维素样变性;嗜酸性增强(图2)。对照组绒毛外合体滋养细胞体积较大,胞浆丰富,且相互融合,内层的细胞滋养细胞核呈空泡状,细胞轮廓清晰;绒毛内间充质细胞呈星芒状排列(图1)。3.流产组与正常组绒毛组织中PAPP-A的分布与表达流产组与对照组绒毛组织中均可见到PAPP-A表达的阳性棕黄色颗粒。PAPP-A表达于绒毛外层滋养细胞的胞质中(见图3、4)。两组之间PAPP-A表达差异有统计学意义(P<0.05),其中流产组绒毛组织中PAPP-A阳性细胞表达以1+为主,对照组主要以0+、1+为主,且流产组PAPP-A平均灰度值较对照组高。结论:1.自然流产或胚胎发育异常患者血清中PAPP-A水平降低,可同时伴有绒毛组织中PAPP-A表达水平降低。2.血清PAPP-A水平的下降与难免流产发生有相关性,故可以将血清PAPP-A水平作为临床筛查不良妊娠结局的指标。