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皮肤伤口修复一个复杂的病理生理过程，由多种分子和细胞共同参与，包括炎症反应期、增生期、塑型期三个阶段。Toll样受体家族(toll like receptors，TLRs)是存在于哺乳动物中的一种模式识别受体(pattern recognition receptor，PRRs)，通过鉴别病源相关模式(pathogen associated molecular pattem，PAMPs)识别病原体，形成机体免疫的第一条防线。其中TLR3可以识别病毒产生的双链RNA，从而诱导机体产生免疫反应。Poly(I:C)作为一种人工合成的双链RNA，是TLR3的激动剂。在临床上Poly(I:C)常用于治疗病毒性肝炎，然而近年来临床和实验中均发现它能够促进皮肤伤口愈合，但其中具体的分子机制仍不清楚。本课题应用野生型小鼠伤口和TLR3基因敲除小鼠伤口两种动物模型，探讨Poly(I:C)促进伤口修复的相关机制及对TLR3受体的作用。 研究目的： 探究Poly(I:C)对伤口愈合的作用，检测TLR3受体和TGF-β/Smad3信号通路是否参与其中，以及Poly(I:C)能否影响α-SMA和Collagen I的表达。 研究方法： 在小鼠背部两侧分别建立皮肤伤口模型，通过给予 Poly(I:C)（处理组）和PBS（对照组），观察小鼠伤口愈合情况，采集图片评价伤口愈合率。伤口及边缘组织mRNA及蛋白提取后，应用RT-PCR检测TGF-β/Smad3通路、α-SMA和Collagen I的基因表达水平；Western Blot检测TGF-β/Smad3通路、α-SMA和Collagen I的蛋白表达水平；ELISA测定组织中TGF-β蛋白水平的变化；伤口皮肤组织固定后经Masson染色、HE染色，观察伤口胶原蛋白的增殖情况以及肉芽组织与新生血管的形成情况。 研究结果： 1、Poly(I:C)对野生型小鼠皮肤伤口的愈合作用 建立C57BL/6小鼠皮肤伤口模型，经Poly(I:C)或PBS处理后，处理组皮肤伤口愈合的时间为10天，对照组为12天。组织学检查发现，Poly(I:C)处理后胶原蛋白含量增多，肉芽组织生成较对照组增加，再上皮化更明显。伤口局部TGF-β/Smad3通路、α-SMA及Collagen I基因与蛋白表达量均增加。 2、Poly(I:C)对TLR3基因敲除小鼠皮肤伤口的愈合作用 建立TLR3基因敲除小鼠皮肤伤口模型，经Poly(I:C)或PBS处理后，处理组与对照组皮肤伤口愈合的时间均为12天, Poly(I:C)对TLR3基因敲除小鼠的皮肤伤口愈合时间没有影响。组织学检查发现，处理组与对照组的胶原蛋白含量及肉芽组织的形成十分相近。处理组伤口局部TGF-β/Smad3通路、α-SMA及Collagen I基因及蛋白表达量与对照组基本一致。 研究结论： Poly(I:C)是通过激活TLR3受体发挥促进创伤修复的作用。Poly(I:C)激活TLR3受体后增加I型胶原的合成，上调α-SMA的表达促进皮肤伤口愈合，TGF-β/Smad3信号通路参与其中。