重组hIL-10抗家兔移植排斥反应及其对Th1/Th2类细胞因子的影响

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目的:探讨重组人IL-10(rhIL-10)在同种异体家兔抗皮肤移植排斥反应中的作用及其对细胞因子的影响。方法:以18只家兔作为受体,18只家兔作为供体,建立动物模型,进行家兔皮肤移植。实验共分6组:①组:rhIL-10低剂量组;②组:rhIL-10高剂量组;③组:CsA低剂量组;④组:CsA高剂量组;⑤组:rhIL-10(5μg/kg)+CsA(5mg/kg);⑥组:生理盐水。术后连续28天观察皮肤移植家兔的皮片愈合情况、皮片出现排斥的时间和移植皮片的存活时间;于术前1天、术后1天、4天、7天、14天、21天及28天采血,分离血清,用ELISA方法观察移植组织中IL-2、IL-4、IL-10、TNF-α及IFN-γ的变化情况。结果:1.受体家兔的移植皮片出现排斥的时间①、②分别为6.67天和9.00天,③、④、⑤组分别为12.00天、19.67天、16.16天,⑥组为4.33天。①组与⑥组比较虽然时间推迟,但无差异性,②、③、④、⑤组与⑥组相比,出现排斥时间明显延长,且差异显著,(p<0.05)。2.①、②组受体家兔的移植皮片平均存活时间分别为13.33天和16.00天;③、④组分别为15.33天和21.33天;⑤组为19.00天;⑥组为7.67天;①、②、③、④、⑤组分别与⑥组相比较,每两组差异都有统计学意义(P<0.05);①、②组与④组、⑤组两两比较,也存在显著差异(P<0.05)。3.IL-2检测结果表明,术后各组均有不同程度升高,其中以⑥组升高最为明显,并于4-7天达到最高峰后缓慢下降,但仍高于其他各组,与②、③、④、⑤各组相比有显著性差异(P<0.05);①、②组与⑤组相比IL-2升高,且差异显著。(P<0.05)。4. TNF-α检测结果表明,术后1天,⑥组与其他组相比其表达水平迅速升高,于术后4天达最高峰后缓慢下降,但仍高于其他各组,与其他各相比较,有显著性差异(P<0.01),⑥组和①、②组分别比较,每组均有差异性(P<0.05);①组与②组相比较,差异性不显著(P>0.05)。5.INF-γ检测结果表明,术后1天,⑥组与其他组相比其表达水平迅速升高,于术后4天达最高峰后缓慢下降,但仍高于其他各组,与其他各相比较,有显著性差异(P<0.01),①组与②组相比较,差异性不显著(P>0.05)。6.IL-4检测结果表明,除⑥组外,其他各组的表达水平都有缓慢升高,在术后第4天后各组上升较为明显,其中④组和⑤组分别在术后第7天达到最高峰,①、②组在14天左右时达到最高峰,⑥组与其他各组比较,有显著性差异(P<0.01);⑤组与①、②、③各组分别比较显著性也均有显著性差异(P<0.05);①组与②组相比较,差异性不显著(P>0.05)。7.IL-10检测结果表明,术后1天的⑤组升高较快高于其他组,在第4天后下降并一直处于较低水平,其他组分别有不同程度的升高,其中以②组升高最为明显,并于术后第7天达到最高峰,与④、⑤、⑥组相比较各组均有显著性差异(P<0.05);①组与②组相比较,差异性不显著(P>0.05);⑤组与其他各组相比较均有显著性差异(P<0.05)。结论:rhIL-10具有抑制家兔皮肤移植排斥反应的作用,可以使出现排斥反应时间推迟,延长移植物的存活时间;rhIL-10能够降低皮肤移植家兔IL-2、TNF-α及INF-γ的表达,表明rhIL-10通过对细胞因子表达的控制来实现抗皮肤移植排斥效应;研究表明rhIL-10与CsA联合应用可降低CsA副作用,rhIL-10和CsA具有协同作用,能增强抗移植排斥的效果。
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