膀胱癌中CDH13表达及其启动子甲基化的意义

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目的:研究CDH13在膀胱移行细胞癌组织中的表达及其与患者临床病理特征和预后的关系,为膀胱癌的诊断、恶性行为评估以及预后判断提供理论依据和研究基础。研究膀胱移行细胞癌组织中CDH13基因启动子甲基化状态,结合第一部分研究结果分析CDH13基因启动子甲基化与其表达减少的相关性,并结合临床病理资料分析CDH13基因启动子甲基化与膀胱移行细胞癌发生发展以及患者预后的关系,为膀胱移行细胞癌的诊断、监测以及预后判断提供新的标志物。研究在膀胱癌5637细胞系中CDH13的表达被特异性地抑制后对细胞的增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:应用免疫组化检测CDH13在37例正常膀胱粘膜组织和113例膀胱移行细胞癌组织中的表达,并与肿瘤的数目、大小、形态、复发、分级、分期以及患者的年龄、性别和预后等临床病理资料相联系进行统计学分析。应用甲基化特异性PCR检测113例膀胱移行细胞癌组织和37例正常膀胱粘膜组织中CDH13基因启动子甲基化状态,结合第一部分研究结果分析CDH13基因启动子甲基化与其表达减少的相关性,并与肿瘤的数目、大小、形态、复发、分级、分期以及患者的年龄、性别和预后等临床病理资料相联系进行统计学分析。应用CDH13siRNA转染膀胱癌5637细胞特异性地抑制CDH13的表达,并应用荧光定量PCR和western blot技术检测RNA干扰效果,然后进行MTT细胞增殖实验、Transwell细胞迁移和侵袭实验,并将结果进行统计学分析。结果:(1)CDH13在膀胱移行细胞组织中表达减少,与其在正常膀胱粘膜中的表达相比差异有统计学意义;在膀胱移行细胞癌组织中CDH13表达减少与肿瘤生长、复发、分化不良以及肿瘤浸润密切相关,但与肿瘤数目、形态以及患者的年龄和性别无关;此外,53例CDH13表达日常的患者其5年总生存率为86.7%(46/53),60例CDH13表达减少的患者其5年总生存率为68.3%(41/60),差异有统计学意义。(2)CDH13基因在日常膀胱粘膜组织中未出现甲基化,在膀胱移行细胞癌组织中其甲基化率为54.8%,差异有统计学意义;在膀胱移行细胞癌组织中CDH13基因启动子甲基化与其蛋白表达呈负相关;CDH13基因启动子甲基化与肿瘤生长、复发、分化不良、浸润以及患者的不良预后密切相关,但与肿瘤数目、形态以及患者的年龄和性别无关。(3)CDH13siRNA转染5637细胞后CDH13的表达明显减少,与空白对照组和阴性对照组相比CDH13siRNA转染组细胞增殖、迁移和侵袭能力增强,差异有统计学意义。结论:膀胱移行细胞癌组织中CDH13表达减少并且与肿瘤的生长、复发、分化不良、浸润以及患者的不良预后密切相关,这些结果表明CDH13表达减少是膀胱移行细胞癌发生发展和患者预后不良的一个危险因素。CDH13基因启动子甲基化与其表达呈负相关,启动子甲基化是导致CDH13表达减少的主要原因;并且CDH13基因启动子甲基化与肿瘤的生长、复发、分化不良、浸润以及患者的不良预后密切相关,这些结果表明膀胱移行细胞癌组织中CDH13基因甲基化是膀胱癌发生发展和患者预后不良的一个标志物。CDH13siRNA能够特异性地抑制CDH13在膀胱癌5637细胞中的表达,CDH13表达减少后5637细胞增殖加快、迁移和侵袭能力增强,这些结果表明CDH13表达减少与膀胱癌恶性生物学行为有关,是导致膀胱癌发展的一个重要因素。
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