荧光假单胞菌CP1108的发光酶基因(luxAB)标记及其应用

来源 :安徽农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:zeiwu158
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
Pseudomonassp.CP1108为分离自棉花根圈的解磷假单胞菌,经过16S rDNA序列比对,鉴定为荧光假单胞。通过三亲本杂交的方法将标记基因luxAB接合转移进CP1108菌株,所得的标记菌株CP1108L具有发光活性和对Str、Tet和Km三种抗生素的抗性,转移频率为(4.65±0.01)×10 5。将标记菌株经连续进行20 次传代,均可检测到发光现象。采用碱裂解法从CP1108L中提取质粒,证明pTR102质粒已成功地转移到CP1108菌株中,并且发现CP1108L菌株的部分生理生化特性、生长曲线和在土壤中的存活能力并没有受到luxAB基因导入的影响。   研究标记菌株在土壤中的存活情况,结果发现,在0~42d内,标记菌株在灭菌土壤和不灭菌土壤中均能存活,总体呈现下降趋势,在灭菌土壤中的定殖水平稍高于不灭菌土壤,第42d时,标记菌株的定殖密度约为103~104cfu·g 1 土。将标记菌株CP1108L接种到棉花根盒的微宇宙土壤中,研究其定殖情况,发现标记菌株在棉花根表的定殖密度高于根际土壤中的定殖密度,主要定殖在0~6cm 根段,且随着深度的增加定殖密度降低;棉花生长14d时,CP1108L在棉花根圈达到了最高定殖水平,根圈的的定殖数量为2.31×10 5cfu·g1 根土、3.18×10 5cfu·g 1 鲜根,而其中以0~2cm根段处标记菌株的定殖数量最大,根际和根表分别达到了9.08×10 4cfu·g 1 根土、1.44×10 5cfu·g 1 鲜根。   把棉花幼苗根部浸于细菌菌液中,研究了细菌在棉花幼根根表的吸附情况。发现稳定吸附发生在细菌与棉花幼根接触的前8min,在前60min 内,细菌的吸附量随吸附时间的延长而增大,并且逐渐趋于饱和,解磷菌的最大吸附量为(1.02~1.48)×10 8cell·g 1 鲜根;从细菌的吸附动态曲线可以看出,其吸附规律符合Langmuir吸附等温线。经计算,E.coliDH5α、CP1108和CP1108L在棉花根表的最大吸附量q0分别为4.05×10 6cell·g 1、1.45×10 8cell·g 1和1.19×10 8cell·g 1。解磷细菌的最大吸附量(10 8cell·g 1)约是大肠杆菌的最大吸附量(10 6cell·g 1)的100倍,说明解磷促生菌株对棉花幼根具有较高的亲和性。因此,可将解磷菌株制成微生物接种剂应用于棉花的盆栽试验研究。   对棉花进行盆栽试验,结果发现接种CP1108和CP1108L菌液处理棉花植株的干重、主根长和株高显著高于对照组CKⅠ;两个菌株处理之间差异性不显著,说明luxAB基因的导入对CP1108L促生长能力并没有显著影响。   CP1108 菌株是从棉花根圈筛选出来的具有较强解磷能力的荧光假单胞菌,其标记菌株CP1108L接种到棉花后,性状稳定,能在棉花根部吸附、定殖和存活,从而促进棉花的生长,因此可以用CP1108L代替CP1108进行土壤微生态学研究。
其他文献
苏云金芽胞杆菌是一种能产生芽胞的土壤细菌,它在稳定期形成芽胞以及大量的伴胞晶体形式的杀虫晶体蛋白。晶体蛋白代谢调控机制是苏云金芽胞杆菌研究的热点之一,目前芽胞形成机
  2011年至2012年,美国逻辑学家Daniel Osherson和Scott Weinstein以理由为基础,着重研究了理由与主体的偏好选择之间的关系,并将这一思想形式化,构造了一种基于理由的偏好命题
会议
本研究以某炼油企业经过二级处理达标排放的污水为研究对象,对其进行水质分析、现场勘察和技术论证,将前部原有的工艺流程进行改造和优化,使出水水质得到改善,提出回用处理工艺。
  Classical modal logic is logic of boolean algebras with operators(BAOs)([1] and [2]).It is well-known that the minimal modal logic K is sound and complete w
会议
本论文采用不锈钢微通道反应器,首先考察了Cr2O3/ZnO固溶体催化剂对甲醇水汽重整反应的催化性能。结果表明ZnO是其中的活性组分,Cr的加入有助于催化剂活性和稳定性的提高,这可归因于ZnCr2O4固溶体的形成。但Cr的加入导致CO选择性增加。在浸渍法制备了Zn-Cr催化剂上,考察了甲醇水汽重整、甲醇部分氧化、甲醇氧化重整以及水气变换等反应过程,探讨了甲醇水汽重整和氧化重整两个过程的独立反应网络。
  In this talk,I will present some recent work related to precipitous ideal on ω1.We give an upper bounded of consistent strength of TCG ideal and non statio
会议
  This paper shows the non-triviality of second-order paraconsistent comprehension and Freges infamous Basic Law V.Then,it shows that Humes Principle can be d
会议
学位
  Mammalogical research in the Guianas has had a checkered history beginning with being relatively well known during the time of Linnaeus and then followed by
  In Part 1,I will introduce Frege theorem and Frege arithmetic,then I will give some models of Frege arithmetic,including the fragments of first-order one an
会议