禾谷镰刀菌FgRab7功能及其调控网络初探

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禾谷镰刀菌是引起小麦、玉米等病害主要病原菌,由该病原菌侵染引起的减产和真菌毒素污染不仅影响小麦等农产品品质还对食品及饲料的安全构成威胁,因而在农业生产上备受关注。目前,对该病原菌的研究热点逐渐转向发现新药物作用靶点和弄清其致病机理等方面。功能基因的研究是探索药物靶点的重要途径,本研究从具有分子开关作用的Ras家族中的Rab7基因的敲除入手,目的在于初步了解该基因在禾谷镰刀菌中的分子、细胞等水平的生物学功能,从而进一步了解该分子在菌丝生长、致病性、产孢、产毒素等方面的作用。结果发现,Rab7的敲除影响菌丝生长速度、毒素产量和产孢量。为进一步明确Rab7调控产孢和生长的机制,一方面,我们利用Hjs P u11一down的方法筛选与FgRab7直接互作的蛋白,并运用生物信息学方法与酵母数据库进行比对分忻。结果获得了一个可能跟DON毒素降解相关的酶(15—O一acetyltransferase_rri3)和两个与孢子形成相关的蛋白。另一方面,我们对野生型和敲除突变体进行了蛋白组学分忻,结果显示,FgRab7的敲除对100多种蛋白产生影响,我们选取其中差异在三倍以上的43个蛋白点进行了质谱分忻,并随机抽取了其中的8个蛋白进行了转录水平的:Real—time PCR检测,发现这些基因的表达水平与蛋白水平一致。因此,我们认为FgRab7不仅调控孢子的形成、营养菌丝的生长,还参与DON毒素的合成分泌、代谢酶的表达。这为阐明Rab家族蛋白调控镰刀菌生长发育以及产孢机制,同时进一步为制定更加有效合理的赤霉病治理策略和措施奠定理论基础。
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