量子点-漆酶生物传感器的构建及其在多酚检测中的应用

来源 :齐鲁工业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:gaowufida
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
许多酚类化合物跟人们的生活息息相关,以多巴胺为例,其作为体内一种非常重要的神经递质,它含量的多少直接跟很多疾病相关,如帕金森症。故对于多巴胺含量的检测非常有必要。传统的酚类化合物检测通常采用UV-Vis法,或者HPLC法等,这些方法通常存在检测限高,费时费力等缺点。相对于传统检测法,基于量子点的荧光传感器具有,灵敏度高,检测限低,操作相对简单等优点。本研究利用一种多酚氧化酶漆酶及硫化镉量子点制备成荧光传感器,以酚类化合物多巴胺为检测物进行了检测,达到了良好的检测效果,即较低的检测限和良好的回收率,实现了方便快捷检测低浓度多巴胺的目的。本研究为开发一种用于检测酚类化合物多巴胺的方法,利用多酚氧化酶漆酶及生物合成的硫化镉量子点,制备出了可检测多巴胺浓度的荧光传感器,此方法相对于传统的紫外检测法,液相检测法具有更低检测限,更省时省力,方便快捷等优点。主要结论如下:(1)利用白腐真菌云芝,在液体发酵培养基中以1mM铜离子为诱导剂,于发酵第九天获得了最大酶活1071±21 U/L。发酵粗酶液经30%-80%硫酸铵分级沉淀、透析及DEAE-Sepharose FF柱层析之后,纯化了31倍,且比活达到了165.5U/mg,经SDS-PAGE知得到了较纯漆酶且分子量为60kDa左右。并进一步对纯化后漆酶进行了常规的酶学性质表征,结果表明其最适pH为2,最适温度为35℃,常温偏酸性环境下酶活稳定。(2)利用白腐真菌云芝吸附重金属自组装量子点的特性,首先在Kirk培养基中培养出云芝菌丝球,并通过添加60mg硝酸镉,5mL 0.07mg/L的硫代乙酰胺,0.5 mL巯基乙酸,将Kirk培养基pH调至10,经反应24h后获得了荧光纳米材料硫化镉量子点。然后利用扫描电子显微镜(SEM),紫外-可见(UV-Vis)和光致发光(PL)光谱,傅里叶变换红外光谱(FTIR),热重(TG),透射电子显微镜(TEM)及X射线衍射(XRD)证实了纳米颗粒的表面形态,光学和热学特性,晶体性质,尺寸和形状分布,并且对生物合成量子点的合成机理进行了阐述。(3)将所获得的漆酶及量子点构建成了传感器体系,在7-100μM范围内做出了P0/P对[DA]的校准曲线,相关系数(R2)为0.9904,检测限(LOD)为7μM。并对已知浓度的多巴胺进行了回收实验,回收标准偏差在6%以内。成功构建了检测多巴胺的漆酶-量子点生物传感器。
其他文献
采用青少年亲子与同伴依恋量表、中学生羞耻感量表以及中学生网络欺凌问卷对1165名农村中学生进行问卷调查.结果表明:1、网络欺凌在性别、是否独生子女和是否有留守经历上存
一个复数矩阵A∈C n×n有强-Drazin逆,如果存在复数矩阵X∈C n×n满足X 2A=X,AX=XA,A-AX∈N(C n×n).这里X是唯一的,并且被称为矩阵A的强-Drazin逆.在本文中,若
目的:本研究的目的是确定昆明医科大学第一附属医院住院患者的VTE发病率。其次将观察到的发病率与患者的危险因素和常见的合并症条件联系起来方法:在这项前瞻性观察研究中,数
阅读能力是一个人综合素养的基础,借鉴PISA阅读素养测评体系的相关测评框架和内容来考察我国中考现代文阅读试题,能够为我国阅读素养测评提供一个较为清晰的方向。本文以2009年至2018年上海、南京、温州三地中考语文现代文阅读文本和试题作为研究对象,以实证研究为基本方法,参照PISA测评体系的评价框架,分别从文本情境、文体形式、文本类型、认知过程、试题题型五个维度对三地现代文阅读试题进行评析,总结其特
合成了一种新型支化侧链型偶氮聚电解质PMAPB6P-AA. 以偶氮生色团为探针, 研究了这类聚电解质在混合溶剂中的H-聚集, 以及H-聚集对偶氮生色团光响应性能的影响. 研究发现, PM
设计合成了一种含介晶基元的bola型两亲性分子A,并通过核磁氢谱和质谱对其进行表征.采用电导率仪、透射电镜(TEM)和原子力显微镜(AFM)研究bola型两亲性分子A的水溶液在液固界