黄芪、大黄影响大鼠肾MsC增生及表达TGF-β1的比较研究

来源 :河南中医学院 河南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kingly1988
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目的:通过观察黄芪、大黄对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导下体外培养的大鼠肾小球系膜细胞(primarymesangialcells,MsC)增生的影响及对MsC表达转化生长因子β1(Transforminggrowthfactor–β1,TGF–β1)的影响,探讨黄芪、大黄对肾小球系膜细胞增殖的抑制效果。  方法:培养及鉴定大鼠原代肾小球系膜细胞,并用于实验:首先提取大鼠肾小球并用Ⅳ型胶原酶消化处理,然后体外培养大鼠肾小球,对生长的细胞定期行光镜及免疫组化等鉴定。在细胞培养的基础上,利用脂多糖诱发大鼠肾小球系膜细胞增生模型,将系膜细胞分为控制组、模型组、对照组、黄芪组、大黄组、雷公藤多甙组,通过MTT法检测黄芪、大黄对MsC增殖的影响;采用ELISA法检测黄芪、大黄对MsC表达TGF–β1的影响。  结果:培养的肾小球3d后可见到有细胞生长,14d时镜下细胞多呈短梭形,28d时细胞生长密集,呈星射状或纺锤形,免疫组化示结蛋白阳性。模型组MsC增生活跃,OD值明显高于控制组(P<0.01或P<0.05);模型组TGF-β1含量明显升高,与控制组相比差异有统计学意义(P<0.01),说明造模成功。中药黄芪、大黄均能抑制MsC的增殖,降低对TGF-β1过表达,12h以黄芪抑制作用较强,24h以大黄抑制作用较强,48h两者相比无显著性差异。  结论:培养的细胞为大鼠肾小球系膜细胞;中药黄芪、大黄均能够抑制体外培养的大鼠肾小球系膜细胞的增殖,能抑制MsC对TGF–β1过表达,在作用时间上有所差异。
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