论文部分内容阅读
目的研究微小RNA(MiRNA,miR-126)及血管细胞黏附分子1(VCAM-1)在脂多糖刺激的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的表达,探讨miR-126对内皮细胞炎性反应过程中VCAM-1表达的影响。方法HUVEC培养后分6组,空白对照组,模型组,miR-126 mimic组,miR-126inhibitor组,A组,B组,后4组应用Lipofectamine 2000脂质体分别转染miR-126类似物(miR-126 mimic)、miR-126抑制剂(miR-126 inhibitor)及转染miRNA mimics阴性对照、miRNA inhibitor阴性对照,转染24 h后加入脂多糖(1μg/ml)刺激HUVEC,在8 h时应用实时荧光定量PCR的方法检测miR-126、VCAM-1的mRNA的表达水平;Western blot法检测VCAM-1的蛋白表达水平,并进行比较。结果模型组较空白对照组miR-126 mRNA降低(0.056±0.0041)倍(P<0.01),而VCAM-1 mRNA模型组较空白对照组升高(12.50±2.55)倍(P<0.01),VCAM-1蛋白水平也明显升高(P<0.01)。转染miR-126 mimic的HUVEC在脂多糖刺激下,在8 h时间点检测miR-126的表达,较对照组升高(51.18±2.30)倍(P<0.01),VCAM-1 mRNA水平则明显低于阴性对照组(0.81±0.037)倍(P<0.01),VCAM-1蛋白水平较阴性对照组也明显降低(P<0.01);转染miR-126 inhibitor后,miR-126的表达较对照组降低(0.032±0.011)倍(P<0.01),VCAM-1 mRNA水平高于阴性对照组(1.42±0.10)倍(P<0.05),VCAM-1蛋白表达较阴性对照组也明显升高(P<0.05),差异有统计学意义。结论过表达miR-126在8 h时间点下调VCAM-1的表达,提示miR-126可能通过抑制黏附分子如VCAM-1的表达,参与抑制脂多糖诱导的HUVEC的炎性反应。