蜜环菌固体培养条件的优化

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本文对蜜环菌固体培养条件的优化进行了研究。通过对最适宜培养基、碳源、氮源、生长因子、培养的温度、取样时间等条件的优化,探索蜜环菌的营养需求和培养特征,并确定能高产蜜环菌菌体的最佳培养条件。并对蜜环菌固体培养对数期和稳定期的部分生理生化指标进行测定分析。在麦芽汁培养基中,30℃培养条件下,生长期比25℃培养减少7天。在对数期和稳定期进行多糖、甘露醇等生化指标的测定发现,多糖对数期比稳定期产的多,且差距显著,在对数生长期的多糖含量是9.30%,在稳定生长期的多糖含量是4.71%;甘露糖稳定期比对数期要多,但差异不是很明显,在对数生长期的甘露醇含量是10.09%,在稳定生长期的甘露醇含量是10.59%。生长过程中产还原糖的含量一直非常低。在培养基择优选取中发现在不同介质中的蜜环菌生长有很大的差别,反映出不同的形态。最适合培养基是GPC培养基。在对培养温度的优化中,以30℃培养时菌丝体得率最高,最佳取样时间为23天,后期出现菌体自溶。碳源优化中发现蜜环菌对糖类的利用明显最好,对相应糖醇类的利用尚好,对小分子的乙醇和甘油均能够进行利用,对于淀粉类的利用则较慢。最佳碳源为糊精,最佳浓度为2.5%。氮源优化中发现不管是有机氮源还是无机氮源,蜜环菌都能够很好的进行利用。最佳氮源是豆饼粉,最佳浓度为1.0%。生长因子VB1、玉米浆的添加对蜜环菌的生长无显著有利作用。在单因素试验基础上,选取最佳温度、取样时间、糊精用量、豆饼粉用量四因素为自变量进行响应面试验。结果发现最佳温度为29.92℃,取样时间22.68天,糊精用量为2.49%,豆饼粉用量比为1.96%,验证试验拟合良好。最终确定了蜜环菌固体培养条件如下:最佳温度为30℃,取样时间22.5天,糊精用量为2.49%,豆饼粉用量比为1.96%。
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