两株鳗弧全基因组序列测定及转录组比较分析

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:slow1223rabbit
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
鳗弧菌是水产病害中最常见的细菌病原,可感染鱼虾贝等多种水生动物,对养殖业造成巨大经济损失。鳗弧菌的基因组尚未阐明。本文开展了临床致病鳗弧菌株M3(血清型O1)和非致病标准菌株ATCC43308(血清型O4)的全基因组序列测定、基因组和转录组比较分析,为从整体了解鳗弧菌的生态、生理及致病机制打下基础。   首先用Roche454 FLX Titanium测序得到的序列信息进行基因组骨架组装,然后用AB SOLID测序得到的序列信息进行高覆盖度测序补洞、scaffold搭建及延伸,完成拼接组装,对所获DNA序列进行了全面的生物信息学分析。分析结果显示:M3形成了23个scaffold,contig N50长度为334.6kb,基因组总G+C%含量为44.5%,预测并注释成功的CDS(coding sequence)总数为4009个,CDS平均长度为295aa;含48个tRNA和3个16s-23s-5s rRNA。ATCC43308有15个scaffold,N50长度为240.6kb,基因组总G+C%含量为44.4%,有3820个注释过的CDS,平均长度为293aa,含有49个tRNA和3个16s-23s-5s rRNA。两株菌中注释的约27%CDS都是参与细胞的生命运动代谢过程,包括氨基酸转运和代谢,糖脂的代谢,DNA复制与修复,RNA转录与调控等;约10%CDS与毒力相关,包括粘附素,菌毛,分泌系统和转运系统等。两株菌存在较丰富的水平转移遗传元件,在M3和ATCC43308分别发现28和14个插入序列(IS)、21和19个Tn及18和9个prophage序列成份。   在详细分析两株菌基因组特征基础上,对它们进行了比较基因组研究,发现了鳗弧菌的代谢机制及致病性/毒力强弱的特征。M3基因组比ATCC43308大约230kb左右,而M3注释的CDS比ATCC43308多190个。其中差异基因较多的主要集中在参与信号传导过程、酶代谢、细胞菌膜形成和外膜蛋白以及假定蛋白和COG未包含的蛋白方面。两株菌中均发现了新的溶血素和金属蛋白酶及与T6SS相关基因。结果表明,ATCC43308缺失了荚膜多糖转运系统基因簇wza-wzb-wzc,使得荚膜多糖不能正常输送到胞外;M3中存在更多的有激活转录成份的IS序列,有利于更多基因的表达,并且在M3中发现了T3SS成份,而这些都与细菌的毒性密切相关,推测可能与M3致病性有关。   在转录组测序方面,对M3和ATCC43308基因表达量进行了比较,发现了191个表达有显著差异的基因,其中也包含与致病性相关的毒力因子。   由于鳗弧菌对养殖的严重危害,已有很多方法对其进行检测,如荧光PCR,免疫探针,血清学等。本文根据M3和ATCC43308以及NCBI上已公布的弧菌属全基因组序列,利用toxR-toxS两成份系统序列保守性设计了引物,建立了针对鳗弧菌、溶藻胶弧菌、哈氏弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌和霍乱弧菌六种水产常见病原微生物的多重PCR快速检测方法。结果表明,多重PCR引物特异性强,与其他弧菌及非弧菌无交叉反应,检测灵敏度为10-100 CFU,同时也对临床病料进行了检测,证明该多重PCR效果确实。
其他文献
刘邓大军挺进大别山后,蒋介石立即调动数十万大军进行围剿,到1947年12月,刘邓大军在大别山已处于最为艰难困苦的时期.为了打破国民党数十万大军对我军的堵截和围剿,刘邓首长
该论文系统提出了种种水淹层测井的识别和综合分析技术,成功地利用自然电位曲线 连续且较准确地计算了混合液电阻率.在水淹层评价中,首次应用电阻率横向探测特性法和多元统计
心理测试:下图中,你第一眼看到的是什么?测出只属于你的独特气质!rnA.男人的脸rnB.天鹅rnC.女人的脸rnD.云朵rn答案解析rn选择A:rn生活中的你,是一个很有内涵的人,富有学识和
期刊
在郭小平的学员中,除了全国各地慕名前去学习的学员以外,还有很多来自美国、俄罗斯、加拿大、日本、希腊、菲律宾、马来西亚、印度尼西亚等国家的外国友人。他们崇尚中医学就
学位
期刊
学位
弧菌(Vibrio)中的许多种类是是类疾病特别是夏秋季肠道感染性疾病和水产养殖动物病害的主要病原菌之一.为此研究人员对山东沿海秋季不同水域养殖的几种常作为海鲜食用的海养
1967年9月13日凌晨3点40分,月明星稀,夜色苍茫,清冷的秋风阵阵掠过,一辆军用吉普车悄然停在了中南海刘少奇住所的门前,几名军人出现在王光美面前,向她宣布:“从现在起,你已经