山东省小麦赤霉病菌种群组成、产毒化学型及hpa99和AtMYB44转基因小麦研究

来源 :山东农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lelefeng123
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由禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)引起的小麦赤霉病(Fusarium head blight, FHB)是世界性病害,也是我国小麦生产中的主要病害之一。为了解山东小麦赤霉病菌的种群组成情况,为病害的预测、防治和抗病育种提供依据,我们于2010年~2012年在山东省的11个地区40个市县采集小麦赤霉病穗41份,经组织分离法共获得72个镰刀菌属的菌株,并对它们进行了种类鉴定,产毒化学型和致病性的研究,从而明确了引致山东小麦赤霉病镰刀菌的种群结构,其结果如下:1、采用Nirenberg和Booth形态学鉴定和竞争PCR设计特异引物相结合的方法进行病原菌的鉴定。共鉴定出3种镰刀菌,它们分别是禾谷镰刀菌(F. graminearum)出现频率为95.8%,燕麦镰刀菌(F. avenaceum)出现频率为2.78%,F. meridionale出现频率为1.39%。据此认为F. graminearum是山东省小麦赤霉病的优势致病种。2、采用PCR的方法,设计特异引物对上述菌株进行B型毒素化学型检测。结果表明:在72株菌株中,70株为DON化学型(97.22%),1株NIV型(1.39%),1株DON和NIV复合型(1.39%)。在70株DON化学型菌株中,3株为3-AcDON化学型(4.29%),67株为15-AcDON化学型(95.71%)。在F. graminearum菌株中,只发现15-AcDON化学型。3、在小麦扬花期,采用单花滴注接种法对其中30株菌株进行了致病力测定。结果表明:F. meridionale (SF045-3)菌株的致病力显著低于F. graminearum菌株,F. avenaceum(SF031-4和SF032-2)菌株和F. graminearum菌株致病力相当。产15-AcDON的24株F. graminearum菌株中致病力分化较明显,强致病力菌株和弱致病力菌株比例相当,唯一产NIV的菌株SF05-5和产毒复合型(DON和NIV)的菌株SF05-4的致病力相当,都为中等致病力。4、测定了山东省目前12个主栽小麦品种对赤霉病的抗性水平。结果显示:品种间对赤霉病菌的抗性差异显著。泰农18、淄麦12和洲元9369是目前中抗赤霉病的小麦品种,而鲁麦23、矮抗58和临麦4号是感病品种。5、应用基因枪转化法将拟南芥转录因子AtMYB44基因和水稻细条斑病菌hpa99分别转入春性小麦品种扬麦158和冬性小麦品种山农15,分别获得了转基因小麦植株。对再生植株进行氯酚红(chlorophenol red, CPR)和PCR检测,外源基因已整合到小麦基因组中,转化频率分别为0.306%和0.108%。
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