儿童难治性肺炎支原体肺炎临床特征及其产生机制研究

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目的:寻求早期判别难治性肺炎支原体肺炎(refractory Mycoplasma Pneumoniae Pneumonia,RMPP)的特征性临床表现及干预措施;了解苏州地区MP耐药基因突变现状及MP 23S r RNA的基因突变与RMPP发生之间的关系;探究s B7-H3在RMPP患儿肺泡灌洗液(BALF)中表达水平、与各细胞因子之间的关系及临床意义。方法:对2013年10月~2014年9月期间在苏州大学附属儿童医院住院治疗,并确诊为RMPP的63例患儿(RMPP组)与同期住院治疗的32例普通MPP患儿(MPP组)进行临床特征对照分析研究。收集48例RMPP住院患儿(RMPP组)和32例MPP患儿(MPP组)的肺泡灌洗液(BALF)/鼻咽抽吸物(NPA),应用PCR扩增MP 23S r RNA V区域易发生突变的基因片段并对扩增产物测序,将结果与MP标准株(MP129)基因序列作比对。收集RMPP组43份急性期、30份治疗后及对照组15份BALF,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测s B7-H3、IFN-γ、TNF-α、GM-CSF、IL-1β、IL-8表达水平。RMPP急性期BALF的s B7-H3、IFN-γ、TNF-α、GM-CSF、IL-1β、IL-8水平与对照组及治疗后比较;治疗后BALF的s B7-H3、IFN-γ、TNF-α、GM-CSF、IL-1β、IL-8水平与对照组比较;分析RMPP急性期BALF中s B7-H3水平与IFN-γ、TNF-α、GM-CSF、IL-1β、IL-8的相关性。结果:RMPP组患儿平均年龄高于MPP组,平均热程16.17±4.60天,高于MPP组的平均热程6.97±1.77天;RMPP组患儿大叶性肺炎、呼吸音减低及肺部叩诊有浊音的发生率均高于MPP组;RMPP组BALF中MP DNA拷贝数高于MPP组;RMPP组外周血中WBC计数、中性粒细胞比例、LDH、Ig G、Ig A、Ig M均高于MPP组;RMPP组CRP>40mg/L及ALT升高发生率均高于MPP组;RMPP组胸腔积液、肝脏损伤发生率均高于MPP组;RMPP组使用气管镜冲洗治疗、使用大环内酯类抗生素一个疗程后退热时间及住院天数明显高于MPP组。48例RMPP患儿MP 23S r RNA基因PCR扩增产物46例基因序列出现了点突变,突变率达到95.8%,均为2063位A→G的突变。32例MPP患儿MP 23S r RNA基因PCR扩增产物28例基因序列出现了点突变,突变率达到87.5%,均为2063位A→G的突变。RMPP组与MPP组患儿MP 23S r RNA基因点突变发生率两者差异无统计学意义。RMPP和MPP患儿MP 23S r RNA基因点突变率达92.5%(74/80),其中2063位点A→G的突变率为100%。RMPP急性期BALF的s B7-H3、IFN-γ、TNF-α、GM-CSF、IL-1β、IL-8水平均高于对照组及治疗后;RMPP治疗后BALF的s B7-H3、TNF-α、IFN-γ水平高于对照组;RMPP治疗后BALF中的GM-CSF、IL-1β、IL-8水平与对照组无显著差异。s B7-H3水平与IL-1β、GM-CSF水平呈正相关;与IL-8、TNF-α、IFN-γ水平相关不明显。结论:(1)RMPP易发生于大年龄儿童、更易出现大叶性肺部炎症,BALF中MP DNA拷贝数高,热程长,肝脏受损发生率高,需要支气管镜冲洗治疗的比例高,住院时间长。(2)苏州地区MP耐药状况处于高位水平,达到92.5%,MP23S r RNA基因点突变均为2063位点A→G的点突变。(3)MP耐药发生与MPP病情的严重程度无相关性,MP耐药可能并不是RMPP发生的主要因素。(4)s B7-H3可能通过调控单核-巨噬细胞产生炎症因子,参与MP感染后免疫反应及肺损伤从而导致RMPP的发生及发展。
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