幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)基因组中存在一类低GC含量(35%,远低于HP的39%平均含量)并含有较多插入序列的基因群,被称为可塑区基因(plasiticity region genes)。由于可塑区基因包含了近50%的菌株特异性基因,被认为可能在HP的致病中发挥了重要作用。jhp0933基因是HP可塑区基因的一员,其编码蛋白为假想蛋白,含267个氨基酸,其保守区位于21至185氨基酸之间,可能属于核苷酸转移酶超家族,但具体生物学功能尚不清楚。第一部分,克隆jhp0933全长基因片段、表达并纯化获得JHP933重组蛋白,座滴气相扩散法生长JHP933蛋白晶体,单波长反常散射法(Se-SAD)获得分辨率为2.1?的JHP933蛋白三维结构。根据三维结构,推断JHP933蛋白是核苷酸转移酶超家族的一个新成员,具有核苷酸转移酶超家族的共同结构特征即呈αβαβαβα折叠结构。通过空间结构相似性比对发现,JHP933蛋白的N端核心结构域(11至170氨基酸)与同属核苷酸转移酶超家族的林可酰胺类抗生素耐药相关蛋白Lin A的空间结构高度相似,推测JHP933蛋白也可能具有钝化林可酰胺类抗生素的功能。同时,借助与Lin B复合物的结构比对和叠合,指出了JHP933蛋白上与NTPs及二价金属离子结合的潜在活性位点。第二部分,首先应用PCR技术检测分离自不同消化性疾病的幽门螺杆菌jhp0933,以期了解jhp0933基因的分布情况。对133株HP临床分离株的检测结果显示:jhp0933基因在分离自胃炎、消化性溃疡及胃癌患者HP中的检出率分别为58.7%,54.9%及84.2%,胃炎组、消化性溃疡组的jhp0933基因频率显著低于胃癌组(P<0.05);通过RT-PCR技术证实了jhp0933基因在m RNA水平有表达。为了证实上述结构分析所推测的JHP933蛋白功能,应用DNA同源重组技术成功构建了jhp0933基因缺失的HPJ99突变株;通过克林霉素药敏试验,比对jhp0933基因阳性和阴性临床分离株,以及HPJ99野生株与jhp0933基因缺失株之间的药敏结果,结果未证实JHP933蛋白是林可酰胺类抗生素耐药相关蛋白的推测。应用等温滴定量热法(ITC)验证JHP933蛋白与NTPs(包括ATP、GTP、CTP、TTP和UTP)的相互作用,证实了JHP933蛋白与UTP特异性结合,为JHP933蛋白的酶作用底物的筛选和最终确定提供了有价值的依据。结论:1.经JHP933蛋白三维结构解析,确定幽门螺杆菌JHP933蛋白为核苷酸转移酶超家族的新成员。2.JHP933蛋白存在与NTPs及二价金属离子结合的潜在活性位点,JHP933蛋白可与UTP特异性结合。3.JHP933蛋白N端核心结构域与林可酰胺类耐药蛋白Lin A空间结构高度相似,但药敏试验未能证实其与林可酰胺类耐药蛋白相关。4.从m RNA水平证实jhp0933基因能够表达。jhp0933基因在HP临床分离株的阳性率为60.9%,分离自胃癌患者HP的阳性率显著高于胃炎和消化性溃患者。