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慢性心力衰竭（chronic heart failure,CHF）是各种心脏结构或功能性疾病导致心室射血及（或）充盈功能低下的一种复杂的临床综合征,是心血管疾病的终末期表现和最主要的死因。二参真武汤（Er Shen Zhen Wu Decoction,ESZWD;原复方真武冲剂、温肾益心丹）,是由新安医学第九代传人程晓昱主任基于《伤寒论》中真武汤一方增加了红参、丹参两味药所得的院内制剂,对于治疗心肾阳虚型慢性心衰（chronic heart failure with heart-kidney yang deficiency,CHF-HKYd）疗效显著,然而该方治疗CHF-HKYd的具体药效物质基础和作用机制仍不清楚。目的:本文拟评价该方对CHF-HKYd大鼠的药效学作用,在此基础上利用UPLC-Q-TOF/MS技术分析ESZWD在体外及在正常和CHF-HKYd大鼠体内原型成分与代谢产物,并开展ESZWD中4种化学成分在CHF-HKYd大鼠体内药代动力学研究,为探究ESZWD治疗CHF-HKYd的药效物质基础提供参考。方法:（1）通过双侧甲状腺切除联合阿霉素注射复制CHF-HKYd大鼠模型,评价ESZWD对CHF-HKYd大鼠的药效学作用;（2）利用UPLC-Q-TOF/MS技术分析ESZWD体外化学成分;（3）利用UPLC-Q-TOF/MS技术分析ESZWD在正常和CHF-HKYd大鼠体内原型成分与代谢产物;（4）建立并验证UPLC-MS/MS同时检测去甲猪毛菜碱、乌头碱、芍药苷及丹参新酮4种化合物的方法学并测定ESZWD中4种化学成分在CHF-HKYd大鼠体内药代动力学参数。结果:（1）与对照组相比,CHF-HKYd模型组24 h尿量显著减少（P＜0.05）,舒张期室间隔（diastolic interventricular septum,IVSD/mm）、舒张期左室内径（left ventricular internal diastolic diameter,LVIDd/mm）显著升高（P＜0.05）,二尖瓣舒张早期和晚期峰值流速比（ratio of peak flow velocity between early and late mitral valve diastole,E/A）显著降低（P＜0.05）,血清血清氨基末端脑钠肽前体（N-terminal pro brain natriuretic peptide,NT-pro BNP）水平显著升高（P＜0.05）,血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ,AngⅡ）、醛固酮（aldosterone,ALD）水平显著降低（P＜0.01）。与模型组相比,ESZWD能够显著降低LVIDd（P＜0.05）,升高E/A（P＜0.01）,降低NT-pro BNP、AngⅡ、ALD、活性氧（reactive oxygen species,ROS）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平（P＜0.01）,升高血清超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）水平（P＜0.01）,但对血清肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factorα,TNF-α）,白细胞介素6（interleukin 6,IL-6）含量无显著影响（P＞0.05）。（2）通过对比ESZWD化学成分数据库,本章共检识出ESZWD中67种化合物,包括皂苷类、萜烯类、生物碱类、酚酸类、丹参酮类、脲类、芳香烃类等,其中,君药＞臣药＞佐药。通过与标准品比较,确认了芍药苷、迷迭香酸、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、白术内酯III 6种化合物。（3）ESZWD在正常大鼠血清中共鉴定出34个化合物,其中13种来自君药,15种来自臣药,8种来自佐药。这些化合物主要包括皂苷类、萜烯类、生物碱类、酯类、丹参酮类、挥发油类等。通过与混合标准品比较,鉴定出芍药苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1等4个化合物。代谢产物结果共分析了31种可能的代谢产物,且主要以酯类及生物碱类化合物代谢为主。在CHF-HKYd大鼠血清中共鉴定出30个化合物,包括生物碱类、皂苷类、萜类、丹参酮类、酚类、黄酮类等化合物,其中12种来自君药,12种来自臣药,10种来自佐药,通过标准品鉴定出人参皂苷Rb1。代谢产物结果共分析了15种可能的代谢产物,且主要以生物碱类及丹参酮类化合物代谢为主。（4）所建立的同时检测二参真武汤中4种化学成分的UPLC-MS/MS分析方法快速、稳定、可靠。这些化合物半衰期(half-life,T1/2)近4 h,并于1～2 h达到最高浓度(maximum concentration,Cmax),表观分布容积（volume,V）、清除率（clearance,CL）和Cmax成反比,如乌头碱的CL和V最大,但Cmax最小。此外,芍药苷还存在双峰现象。结论:（1）ESZWD体外化学成分的研究为后期建立该方质量控制标准提供了参考。（2）正常状态和病理状态大鼠体内ESZWD的成分有显著差异,但均主要包括生物碱、皂苷、萜类和丹参酮等,这为ESZWD治疗CHF-HKYd的药效物质基础研究以及后期实验动物的选择提供了参考。（3）去甲猪毛菜碱、乌头碱、芍药苷、乌头碱具有成为ESZWD治疗CHF-HKYd潜在药效物质的特性,其作用机制可能与改善大鼠心肌损伤、降低氧化应激水平、抑制RAAS系统激活有关。