论文部分内容阅读
目的： 目前关于低氧及低氧运动对作为能量感受器的AMPK和作为氧感受器HIF-1之间的关系报道较少，主要集中于体外培养癌细胞等。因此本实验通过AMPK三种不同基因型小鼠，探讨四周低氧、运动、以及低氧训练对HIF-1α蛋白表达的影响，以进一步了解低氧和运动训练对骨骼肌能量代谢信号的调节机制。 方法： C57BL/6J野生小鼠（ Wild-type, WT）、AMPKα2高表达转基因鼠(over-expression, OE)和AMPKα2基因敲除鼠（Knockout, KO)各40只，随机分为常氧对照组（control，C），常氧耐力训练组(endurance training, T），低氧对照组（hypoxia,H）和低氧训练组（hypoxia Training，T）,每组各10只小鼠。低氧方案：低氧对照组和低氧训练组持续四周间歇性低氧，每周连续六天，每天8小时低氧暴露，氧气浓度模拟4500米左右海拔高度，氧浓度约为11％。运动方案：常氧训练组和低氧训练组进行坡度为零，跑速12m/min的跑台训练，每周连续训练6天，每天训练1小时，持续四周。低氧训练组跑台训练的一小时在低氧环境下完成。常氧对照组小鼠饲养房内正常饲养。训练组小鼠最后一次训练后12小时取材。Western Blot法测定骨骼肌总HIF-1α和核内HIF-1α。 结果： 四周常氧耐力训练、低氧及低氧训练后，WT、OE、KO鼠HIF-1α总蛋白、核蛋白与常氧安静组相比均有显著性增加，其中低氧耐力组的核蛋白有非常显著性增加，OE鼠骨骼肌细胞内HIF-1α总蛋白和核蛋白均高于相应的WT鼠，有显著性差异。KO鼠和WT鼠相比没有显著性差异。 结论： （1）常氧耐力训练、低氧及低氧训练可以增加小鼠骨骼肌HIF-1α总蛋白和核蛋白的表达； （2）AMPKα2转基因鼠总蛋白、核蛋白HIF-1α表达变化与野生鼠相比显著性增加，说明AMPKα2的高表达对HIF-1α的稳定，核转位起到了促进作用； （3）AMPKα2基因敲除鼠总蛋白、核蛋白HIF-1α表达变化与野生鼠相比没有显著性差异，说明低氧训练中可能存在其他信号通路代偿了AMPKα2缺失的调节作用。