茉莉酸甲酯对大豆根部茉莉酸和类黄酮合成的影响

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茉莉酸甲酯(MeJA)作为一种信号分子,调节植物生长发育和诱导植物产生系统抗性。本实验室前期研究表明,MeJA对大豆(Glycine max(L.)Merr.)结瘤有促进作用。为了了解外施MeJA是否影响根中一些物质的合成从而影响结瘤,本文通过基因表达分析和化学分析的方法探讨豆科植物根部茉莉酸和类黄酮物质合成情况。   在基因表达水平,我们选用大邑黑豆为材料,分别用不同浓度的MeJA(0、1、10和100 μM)喷施植株地上部分,用RT-PCR法分析根中内源茉莉酸合成途径丙二烯氧化物合成酶基因GmAOS和异黄酮合成途径异黄酮合成酶基因GmIFS的表达情况。结果表明,100μM MeJA处理大豆能在一定时间内诱导根部的GmAOS表达;对照组、1 μM和10 μM处理组根部GmAOS基本不表达;GmIFS在处理前后都有表达。所以大豆外施MeJA,根部GmAOS基因表达呈现浓度和时间效应。   在生理水平,通过顶空固相微萃取-气相色谱(HS-SPME-GC)和高效液相色谱(HPLC)的方法检测不同浓度的MeJA喷施大豆地上部分后,根部MeJA、大豆苷元(Da)和染料木素(Ge)的含量变化。HS-SPME-GC检测内源MeJA结果显示,随着处理天数的增加,MeJA含量大体呈逐渐下降的趋势,MeJA处理能抑制内源MeJA下降速率。HPLC检测类黄酮结果表明,Da和Ge含量大体呈逐渐上升的趋势,其中10μM处理组的Da.和Ge含量明显比对照组高。   为了进一步了解MeJA对豆科植物结瘤的作用机理,我们还选用了研究共生结瘤的模式植物百脉根(Lotus japonicas)为实验的另一材料,首先克隆了百脉根MG-20茉莉酸合成途径的关键酶基因LjAOS、LjAOC,LjLOX的片段,然后检测MeJA处理后百脉根根部LjAOS和LjIFS基因表达情况。结果表明,克隆的百脉根茉莉酸合成途径关键酶基因LjAOS、LjAOC、LjLOX片段和豆科植物苜蓿、大豆等相应基因具有较高的同源性,RT-PCR分析表明MeJA处理促进百脉根中的LjAOS表达。   根据研究结果我们可知,外施一定浓度MeJA能促进根部茉莉酸合成途径关键酶基因的表达和MeJA的合成,具有浓度和时间效应,并初步推断MeJA诱导根部内源MeJA和异黄酮的合成从而影响结瘤。
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