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[目的]从水通道蛋白1的角度阐明急性坏死性胰腺炎(ANP)毛细血管内皮屏障功能障碍的发生机制及大承气汤治疗急性坏死性胰腺炎的部分机理。
[方法]雄性Sprague-Dawley大鼠160只,随机分为对照组、ANP组、生理盐水组、乙酰唑胺组和大承气汤组,制模后各时间点分批处死,处死前经阴茎静脉注入2%Evans Blue。检测血清淀粉酶;观察胰腺、肠壁、肺组织形态学变化并对胰腺组织病理改变进行严重度计分;检测组织毛细血管通透性;检测组织AQP1基因及蛋白表达。
[结果]同时间点相比:(1)对照组无腹水,ANP及生理盐水组有大量腹水,乙酰唑胺组18h腹水量显著高于ANP组,大承气汤组6h、12h、18h腹水量显著低于ANP组;(2)ANP组、生理盐水组大鼠血清淀粉酶水平较对照组显著升高,乙酰唑胺组血清淀粉酶水平3h、6h、18h较ANP组升高,但未达到统计学差异,而大承气汤组淀粉酶水平显著低于ANP组;(3)ANP组、生理盐水组大鼠胰腺、肠壁及肺组织病变较对照组加重,乙酰唑胺组组织病变较ANP加重,大承气汤组病变较ANP组减轻:胰腺组织严重度计分大承气汤组显著低于ANP组;(4)ANP组、生理盐水组大鼠胰腺、肠壁、肺组织毛细血管通透性显著高于对照组,乙酰唑胺组3h血管通透性高于ANP组,大承气汤组6h、12h、18h组织血管通透性则明显低于ANP组;(5)实时定量PCR中,ANP组、生理盐水组大鼠胰腺、肠壁、肺组织AQP1基因表达明显弱于对照组,乙酰唑胺组胰腺组织3h、12h、18h,肠壁组织3h、6h、12h和肺组织3h、6h、12h基因表达明显低于ANP组,而大承气汤组胰腺组织、肠壁组织各时间点及肺组织3h、6h、12h.AQP1基因表达则明显强于ANP组;(6)Western Blot检测中,ANP组、生理盐水组大鼠胰腺、肠壁、肺组织AQP1蛋白表达明显低于对照组,乙酰唑胺组胰腺组织3h、18h,肠壁组织3h、6h,肺组织3h、6h、18hAQP1蛋白表达低于ANP组,大承气汤组胰腺组织各时间点,肠壁组织3h、6h、12h及肺组织18hAQP1蛋白表达则明显高于ANP组。
[结论](1)水通道蛋白1表达下调可能在急性坏死性胰腺炎大鼠毛细血管内皮屏障功能障碍发生中起重要作用。(2)大承气汤可以有效防治急性坏死性胰腺炎大鼠的毛细血管内皮屏障功能障碍,其机制可能与上调水通道蛋白1的表达有关。