类泛素化修饰蛋白家族成员在人脑胶质瘤中的表达研究

来源 :天津中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lionfirst
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目的:检测SUMO通路核心成员SUMO-1、SUMO-2/3、SENP1、SENP2及UBC-9在神经系统肿瘤组织及细胞株中的定位及定量的表达情况,并分析其表达水平与肿瘤分级的关联及未来治疗方向。  方法:本实验以西安奥美生物科技有限公司的病理组织芯片100例及天津市第五中心医院2009年~2014年收集的脑胶质瘤组织(WHO组织病理分级Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级)各12例及8例正常脑组织为研究对象,利用免疫组化检测SUMO通路核心成员SUMO-1、SUMO-2/3、SENP1、SENP2、UBC9在脑胶质瘤组织中的表达,Westernblot方法检测SUMO-1、SUMO-2/3、UBC9在脑胶质瘤组织中的表达量;体外培养人脑胶质母细胞瘤U87、U251及鼠源性胶质母细胞瘤F98细胞株,细胞免疫荧光方法检测SUMO-1、SUMO-2/3在上述三个细胞株及原代培养的胶质细胞中的表达定位,Westernblot方法检测其在细胞株中的表达量。  结果:基于组织芯片的免疫组化结果显示:SUMO1在星形细胞瘤2级中的阳性表达率为4/30(13.33%)、在星形细胞瘤3级中的阳性表达率为14/30(46.67%)、在星形细胞瘤4级中的阳性表达率为26/30(86.67%),主要定位于细胞浆及细胞核中。SUMO2/3在星形细胞瘤2级中的阳性表达率为5/30(16.67%)、在星形细胞瘤3级中的阳性表达率为12/30(40.00%)、在星形细胞瘤4级中的阳性表达率为24/30(80.00%),主要定位于细胞浆及细胞核中。SENP1在星形细胞瘤2级中的阳性表达率为4/30(13.33%)、在星形细胞瘤3级中的阳性表达率为13/30(43.33%)、在星形细胞瘤4级中的阳性表达率为25/30(83.33%),主要定位于细胞浆及细胞核中。SENP2在星形细胞瘤2级中的阳性表达率为4/30(13.33%)、在星形细胞瘤3级中的阳性表达率为14/30(46.67%)、在星形细胞瘤4级中的阳性表达率为27/30(86.67%),主要定位于细胞浆及细胞核中。UBC9在星形细胞瘤2级中的阳性表达率为5/30(16.67%)、在星形细胞瘤3级中的阳性表达率为16/30(53.33%)、在星形细胞瘤4级中的阳性表达率为26/30(86.67%),主要定位于细胞浆及细胞核中。基于收集的脑胶质瘤组织的Westernblot结果显示:游离及共价结合的SUMO1及SUMO2/3、UBC9随着胶质瘤恶性增高表达量呈明显增高趋势(F=15.437,P<0.05)。基于胶质瘤细胞株的细胞免疫荧光结果显示:SUMO1及SUMO2/3主要定位于细胞浆,但在正常胶质细胞中几乎未见表达。基于胶质瘤细胞株的Wseternblot结果显示:SUMO1及SUMO2/3在恶性胶质瘤细胞株U87、U251及鼠源性胶质母细胞瘤F98中均有较高水平表达,明显高于正常胶质细胞(F=14.684,P<0.05)。  结论:SUMO通路核心成员SUMO-1、SUMO-2/3、SENP-1、SENP-2、UBC-9在胶质瘤组织及胶质瘤细胞株中均有较高程度的表达,并随着胶质瘤恶性程度增高而增加。其差异表达程度与肿瘤的发生发展密切相关,可能成为未来临床检测和评价预后的重要预测指标。
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