刺参及两种藻类凝集素的分离纯化及性质研究

来源 :大连水产学院 大连海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lovefish777
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本文研究了养殖刺参(Apotichopus japonicus Selenka)、海黍子(Sargassum kjellmanianum Yendo)及裙带菜(Undaria pinnatifida)三种海洋生物凝集素。实验采用磷酸盐缓冲溶液(0.015mol.L-1Na2HPO4-NaH2PO4,pH 7.2)抽提,硫酸铵分级沉淀,透析,DEAE-52纤维素离子交换层析和Sephadex G-200、G-150凝胶层析,从中纯化出刺参凝集素(AJL)、海黍子凝集素(SKL)、裙带菜凝集素(UPL)。用凝胶层析测得其分子量分别为85652D、16437D、31357D。在对兔、鼠、鲤鱼、鸡和人的A、B、AB、O红细胞的凝集作用实验中,除刺参凝集素对鲤红细胞无凝集活性外,其余均表现出一定程度的凝集活性。三种凝集素凝集兔红细胞的糖抑制实验中,刺参凝集素不被D-果糖、D-甘露糖、葡萄糖、蔗糖、甘露聚糖、γ-球蛋白所抑制,而被牛甲状腺球蛋白所抑制,其最小抑制浓度为1.55mg.mL-1。三种凝集素凝集兔红细胞的作用不被二价金属离子Ca2+,Mg2+及EDTA所抑制。三种凝集素在pH4.0~l0.14系列缓冲液中均有活性,其中在pH4.4~9.51范围内血凝活性最高。三种凝集素活性在90℃加热30min后仍然对红细胞有凝集活性,显示出较高的热稳定性,说明这三种凝集素具有很强的耐热性。
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