结球甘蓝相对于大白菜连锁群特异分子标记的建立及应用

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在易位系创建中,对易位系中的外源染色体片段进行准确鉴定十分重要。为了实现大白菜—结球甘蓝易位系中结球甘蓝染色体片段的精确鉴定,本研究以4个大白菜品种和4个结球甘蓝品种为试材,对位于芸薹属结球甘蓝C基因组9个连锁群的91个SSR标记和458个InDel标记进行了PCR筛选,筛选出320个结球甘蓝相对于大白菜的特异分子标记。并利用筛选出的结球甘蓝C02连锁群特异InDel标记对实验室创建的一个大白菜—结球甘蓝易位系进行了初步鉴定。主要研究结果如下:1.利用4个大白菜品种‘85-1’、‘新津绿’、‘北京新三号’、‘秋珍白’和4个结球甘蓝品种‘11-1’、‘8398’、‘蓝宝’、‘晚丰甘蓝’为试材,对均匀分布于结球甘蓝C基因组9个连锁群的的91个SSR标记和458个InDel标记进行了PCR筛选,筛选出320个结球甘蓝相对于大白菜的特异分子标记。34个结球甘蓝相对于大白菜的特异SSR标记,涉及甘蓝的9个连锁群,其中位于C01连锁群1个,C02连锁群5个,C03连锁群4个,C04连锁群2个,C05连锁群2个,C06连锁群3个,C07连锁群3个,C08连锁群7个,C09连锁群7个。286个结球甘蓝相对于大白菜的特异InDel标记,涉及甘蓝的9个连锁群,其中位于C01连锁群31个,C02连锁群45个,C03连锁群54个,C04连锁群24个,C05连锁群22个,C06连锁群20个,C07连锁群32个,C08连锁群34个,C09连锁群24个。初步建立了结球甘蓝相对于大白菜特异的分子标记体系。2.利用筛选出的结球甘蓝C02连锁群45个特异InDel标记,对实验室创建的一个添加结球甘蓝C02连锁群片段的杂合大白菜—结球甘蓝易位系AT7-13进行了鉴定。在35株AT7-13自交后代F2材料中,有6株材料仅在InDel标记C02-45(物理起始位置18551678bp)中具有结球甘蓝的特异条带,在C02-45相邻两侧的特异标记C02-14(物理起始位置18096496bp)和C02-15(物理起始位置18786494bp)中均未出现结球甘蓝的特异条带,说明该易位系中添加的结球甘蓝片段位于InDel标记C02-14和C02-15位点之间。3.对6株具有结球甘蓝特异标记的AT7-13自交后代F2植株进行减数分裂观察。结果表明:6株植株在减数分裂的过程中,染色体联会正常,没有出现单价体和多价体情况,证明了这6株易位系植株具有细胞学遗传稳定性。4.利用结球甘蓝C02连锁群特异InDel标记C02-45对AT7-13自交后代F3代植株进行分子鉴定,19株F3代植株中有18株出现结球甘蓝的特异条带。
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