论文部分内容阅读
龙胆科花锚属植物椭叶花锚（Halenia elliptica D.Don）又称“藏茵陈”，主要分布于青藏高原。椭叶花锚全草入药，其性味寒苦，功能清热利湿，平肝利胆，在藏医药系统中用于治疗肝胆系统疾病，是藏医常用药材。
酮是椭叶花锚中的活性成分。本研究采用硅胶柱、SephadexLH-20凝胶柱等方法，从花锚药材中分离、提纯、鉴别了8个主要(口山)酮类成分，它们是7个(口山)酮苷元和1个(口山)酮苷，包括1-羟基-2,3,5-三甲氧基-(口山)酮(HM-1)、1-羟基-2,3,4，7-四甲氧基-(口山)酮(HM-2)、1-羟基-2,3,4,5-四甲氧基-(口山)酮(HM-3)、1，7-二羟基-2,3,4,5-四甲氧基-(口山)酮(HM-4)、1,5-二羟基-2,3-二甲氧基-(口山)酮(HM-5)、1，7-二羟基-2,3-二甲氧基-(口山)酮(HM-7)、1，8-二羟基-2,3-二甲氧基-(口山)酮（HM-8）和1-O-[β-D-木糖-(1-6)-β-D-葡糖]-2,3,5-三甲氧基-(口山)酮(HM-6)，并采用HPLC-DAD法对花锚中的主要有效(口山)酮类成分酮进行检测。
本项研究对3个花锚药材中含量较高的活性(口山)酮化合物HM-3、HM-4及HM-5进行了大鼠体外肝脏微粒体代谢转化的研究，对另一个含量较高的活性(口山)酮化合物HM-1进行了大鼠体内代谢转化的研究，鉴定其主要代谢产物，确定了其体外、体内代谢转化的主要途径。
利用高效液相色谱-电喷雾-离子阱-飞行时间质谱(LC-ESI-IT-TOF)鉴定上述3个(口山)酮同化合物的体外代谢产物，并利用1H-NMR及13C-NMR鉴定HM-5的主要代谢产物HM-5B。在大鼠体外共鉴定了8个代谢产物，其中有5个化合物未见报道。确立的主要代谢途径表明，HM-3、HM-4和HM-5的体外代谢转化主要发生在(口山)酮母核结构的C-2、C-4、C-5和C-6位。
采用LC-ESI-IT-TOF鉴定大鼠i.V.给药活性(口山)酮化合物1-羟基-2,3,5-三甲氧基(口山)酮(HM-1)后胆汁中的Ⅰ相和Ⅱ相代谢产物，并推测其代谢转化途径，从而研究HM-1在SD大鼠体内代谢转化。利用LC-ESI-IT-TOF对经酶水解前后的大鼠胆汁样品分别进行在线分析，结果共检测到4个代谢产物，Ⅰ相代谢产物为HM-5，Ⅱ相代谢产物为HM-5的2个葡糖醛酸结合物和HM-5的1个硫酸结合物，同时还检测出HM-1的2个葡糖醛酸结合物。HM-1在大鼠体内代谢转化成HM-5，属于去甲基化的Ⅰ相代谢反应。同时，母药HM-1和代谢产物HM-5也代谢转化成葡萄糖醛酸型结合物和硫酸型结合物，其中Ⅱ相代谢产物以葡糖醛酸型结合物为主。
综上所述，大鼠体内、体外代谢转化研究显示，结构相似的(口山)酮化合物的代谢转化具有特征性，其发生的Ⅰ相代谢反应为去甲基化，Ⅱ相代谢反应为葡萄糖醛酸化和硫酸化。