灭线磷降解菌的分离鉴定及其降解特性研究

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本文以有机磷杀线虫剂灭线磷为研究对象,对灭线磷的测定分析方法,降解微生物的富集分离,菌株降解特性等进行了系统的测定,包括外加碳氮源种类以及碳氮摩尔比、不同底物浓度、不同温度、pH值对DS-1降解灭线磷特性的影响,并对降解酶的降解特性进行了初步研究,以期能为降解环境中残留的灭线磷提供理论依据。主要结果如下:   1.初步建立用紫外分光光度法测定灭线磷含量的分析方法。在灭线磷降解菌的筛选、降解特性研究等试验中采用紫外分光光度法测定灭线磷的含量,快速、简便、结果准确,可以比较方便可靠地进行降解菌降解能力的测定。   2.从长期施用灭线磷的土壤中采集土样,通过富集培养方法分离出能降解灭线磷的细菌DS-1,并能以灭线磷为唯一碳源生长。结合生理生化特性及16S rDNA序列相似性分析将其鉴定为蜡状芽孢杆菌(Bacilluscereus)。其GenBank登录号为GQ149481。   3.测定了不同外加碳氮源及碳氮摩尔比、灭线磷浓度、pH值、温度对蜡状芽孢杆菌DS-1降解灭线磷能力和生长量的影响。结果表明,最佳碳源和氮源分别为蔗糖和硫酸铵,最佳碳氮摩尔比为4:1,灭线磷浓度为50mg·L-1时,最佳pH为7.0,温度为30℃,降解效果最好。   4.对降解菌DS-1的降解酶进行了初步研究。比较了降解菌的胞内酶和胞外酶的降解活性,确定该菌的降解酶主要为胞内酶。对胞内酶在不同条件下的活性进行了探讨,结果表明,酶的最适温度为30℃,最适pH为7.0,灭线磷降解酶的米氏常数Km为1.06×10-1mol·L-1,最大反应速度Vmax为29.59nmol·min-1。   5.测定了常用杀菌剂对降解菌生长和灭线磷降解率的影响。明确了一些常用杀菌剂对DS-1的生长和DS-1对灭线磷降解能力的影响。试验表明,保护性杀菌剂对DS-1的生长以及灭线磷降解的影响较大,内吸性杀菌剂与对照无明显差别,同时杀细菌剂对DS-1的生长以及灭线磷降解的影响高于杀真菌剂。
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