芍药苷-6’-O-苯磺酸酯(CP-25)对小鼠胶原性关节炎的治疗作用及初步机制

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目的:芍药苷-6’-O-苯磺酸酯(Paeoniflorin-6’-O-benzene sulfonate,CP-25)是课题组新近合成的新的单体衍生物,本研究在建立小鼠胶原性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型基础上,以多发性关节炎指数、踝关节和脾脏病理形态学为指标首次研究CP-25对小鼠CIA的治疗作用,并与同剂量芍药苷(Paeoniflorin,Pae)和白芍总苷(total glueosides of paney,TGP)进行了比较;观察CP-25对CIA小鼠胸腺指数、脾脏指数,T、B淋巴细胞增殖,血清、胸腺淋巴细胞、脾脏淋巴细胞和巨噬细胞(peritoneal macrophage,PMφ)分泌细胞因子的影响,初步探讨CP-25对小鼠CIA作用的部分机制。方法:建立CIA小鼠模型,分别以CP-25(8.725、17.5、22.5、35、45、70、90、140、180mg·kg-1)组、Pae(35、70、140mg·kg-1)组、TGP (35、70、140mg·kg-1)组,强的松(Prednisone,Pre,5mg·kg-1)组,灌胃给药(intragastric administration,ig)(d24-d44)。计数法测定多发性关节炎指数,称重法测定胸腺、脾脏指数,ELISA法检测巨噬细胞分泌TNF-α、IL-1、PGE2水平,胸腺和脾脏淋巴细胞上清液分泌的IL-2、IL-4、IL-10、IL-17、TGF-β1水平,MTT法检测T、B细胞的增殖反应,苏木素和伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色显微镜法观察踝关节和脾脏组织病理学变化。结果:1.CP-25对小鼠CIA的治疗作用与模型组比较,CP-25(22.5、35、45、70、90、140、180mg·kg-1)对CIA小鼠多发性关节炎指数有不同程度的改善作用,且CP-25对小鼠CIA治疗作用好于同剂量的Pae和TGP;与模型组比较,CP-25(35、45、70、90、140、180mg·kg-1)组能减轻CIA小鼠踝关节滑膜组织炎性细胞浸润、滑膜增殖,CP-25(70、90、140、180mg·kg-1)组能减少脾脏组织白髓增生,降低生发中心数目。2. CP-25对CIA小鼠免疫失衡的调节作用与模型组比较,CP-25(35、45、70、90、140、180mg.kg-1)组可显著抑制CIA小鼠T,B淋巴细胞的增殖,抑制作用好于同剂量的Pae和TGP,CP-25(10-5、10-6、10-7、10-8mol·L-1)体外用药在24h、48h、72h可显著抑制CIA小鼠T,B淋巴细胞的增殖;与模型组比较,CP-25(22.5、35、45、70、90、140、180mg·kg-1)能降低CIA小鼠淋巴细胞和血清细胞因子IL-2、IL-17的水平,提高细胞因子IL-4、IL-10和TGF-β1的水平,调节作用好于同剂量的Pae和TGP。与模型组比较,CP-25(22.5、35、45、70、90、140、180mg·kg-1)不同程度抑制CIA小鼠PMφ产生IL-l、TNF-α和PGE2,抑制作用好于同剂量的Pae和TGP。结论:1. CP-25对小鼠CIA有明显治疗作用。2. CP-25对小鼠CIA的治疗作用与其调节T、B淋巴细胞和PMφ功能有关。3. CP-25抗炎免疫作用强于TGP和Pae。
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