L-丝氨酸高产菌株的选育及发酵条件优化

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L-丝氨酸(L-serine)是一种非必需氨基酸,具有许多重要的生理功能,在医药、食品、化妆品等领域有着较为广泛的应用。直接发酵法生产L-丝氨酸是国内外研究的热点。选育一株能直接利用糖质原料高产L-丝氨酸的菌株具有十分重要的意义。本论文采用诱变的方法筛选得到能够直接利用蔗糖高产L-丝氨酸的菌株,并对其进行发酵条件优化,得到以下结论:对实验室保藏的能直接利用蔗糖发酵生产L-丝氨酸的C. glutamicum SYPS-062进行自然分离,经初筛、复筛及遗传稳定性考察后确定一株产酸为6.65g/L,遗传稳定性较好的菌株C. glutamicum SYPS-062-36为诱变出发菌株。首次利用150 mg/mLD-丝氨酸作为筛子对诱变菌株进行筛选,获得突变株C. glutamicum SYPS-062-33a-18,其L-丝氨酸产量为11.0g/L,较出发菌株产酸量提高了65.4%。对诱变得到的C. glutamicum SYPS-062-33a-18进行发酵条件优化,得到最佳的培养基组成为(g/L):蔗糖83,硫酸铵30,磷酸二氢钾3,轻质碳酸钙30,MgSO4·7H2O 0.5,FeSO4·7H2O 0.02,MnSO4·H2O 0.02;VB1 100μg/L,生物素33μg/L。底物蔗糖的浓度从60 g/L提高到83 g/L。最佳培养条件为:种龄24 h,接种量5 %,装液量10 mL。优化后L-丝氨酸产量达到16.4 g/L。
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