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目的研究三甲基氯化锡(Trimethyltin Chloride,TMT)对肾氢钾ATP酶(H~+-K~+-ATPase,HKA)活性的抑制作用,阐明TMT中毒致低钾血症的确切机制。方法(1)断头处死大鼠,取肾,制备肾组织匀浆(10%)。按酶活性测定试剂盒的方法,观察肾组织匀浆浓度,反应时间,哇巴因及sch28080对酶活性的影响,确定最佳实验条件。在反应体系中,加入0,5,25,125和625μM的TMT,测定肾HKA的活性,用肾脏HKA酶特异抑制剂Sch-28080作为质控。(2)取SD大鼠24只,随机分为4组,分别腹腔注射TMT0、10、21.5、46.4mg/kg 1小时后经心脏采集动脉血进行血气分析;其后断头处死动物,取血浆测定K~+、Na~+、Cl~-、GLU、CK、CK-MB、LDH、HBDH、AST、ALT;取一侧肾脏测定HKA和钠钾ATP酶(NKA);另一侧肾脏进行HKA免疫荧光原位观察和组织病理学观察。(3)取SD大鼠36只,随机分为6个组,其中3个实验组,分别经腹腔注射TMT(10mg/kg),另3组为对照组,分别给予生理盐水(10ml/kg)。分别于染毒后第0、2、5天进行24小时代谢实验,收集24小时尿液,检测尿中K~+、Na~+、Cl~-、GLU、Cr;其后按(2)的方法处理动物,用多元相关分析法分析血中K~+、pH、尿K+、pH与肾HKA活性的相关关系影响。(4)取SD大鼠肾小管进行上皮细胞原代培养,角蛋白免疫荧光法鉴定上皮细胞,免疫荧光法观察HKA在集合管细胞上的表达情况,用膜片钳全细胞记录观察TMT对集合管细胞钾通道的影响,用激光共聚焦方法观察TMT对集合管细胞内pH的影响。结果在HKA活性测定的反应体系中,加入不同浓度的TMT,肾组织匀浆中HKA活性从18.33降到13.07(μmolPi/mgpro/h)(P＜0.01,),与Sch28080(100μM)的抑制作用一致,并呈剂量反应关系(R=0.790,P＜0.01)。TMT10、21.5和46.4mg/kg均可使大鼠肾HKA活性、血钾和血pH显著下降(分别为,P＜0.01,P＜0.01和P＜0.05),HKA活性与血钾血pH水平呈正相关,R值分别为0.631(P＜0.05)和0.778(P＜0.01)。TMT10mg/kg染毒后1、3、6天大鼠均出现血钾下降、血pH降低,尿排钾持续增多,尿pH值明显升高(P＜0.01);肾HKA的活性显著下降(P＜0.01),且随染毒时间呈不断下降趋势;HKA活性与血钾、血pH水平呈正相关R值分别为0.699(P＜0.01)和0.540(P＜0.05),与尿pH呈负相关(R=-0.843,P＜0.01),而与尿钾浓度和尿钾量的相关性不明显。TMT可开放肾集合管上皮细胞的钾通道,导致细胞内H~+水平升高。结论TMT抑制了肾HKA的活性,引起机体对钾重吸收和氢分泌的障碍,导致钾经肾流失和氢在体内的潴留,出现了低钾血症和酸中毒。