论文部分内容阅读
克氏原螯虾(Procambarus clarkii),属于甲壳纲,十足目,爬行亚目,原产于墨西哥北部以及美国南部,三十年代末引入南京,现主要分布于长江中下游流域。随着克氏原螯虾养殖规模的日益扩大,且规模化全人工育苗技术尚未成熟,克氏原螯虾养殖苗种主要依赖于采捕天然苗,加上环境污染等原因,造成野生资源量大量减少,因此亟需开展野生群体遗传结构分析。本研究利用微卫星标记技术(SSR)对长江流域克氏原螯虾野生群体遗传多样性行了初步分析,为克氏原螯虾的种质资源保护、育种以及遗传改良提供理论依据。此外由于养殖过程中出现个体变小、病害频发等问题,还进行了饲料组分即不同蛋白水平和不同虫草添加量对克氏原螯虾生长及免疫的影响的研究,为克氏原螯虾优质饵料的配制积累了必要的资料基础。
试验一长江流域克氏原螯虾地理种群遗传多样性的微卫星分析
本研究运用应用5个高度多态性的微卫星座位(PclG-02、PclG-04、PclG-08、PclG-17、PclG-28),对巢湖群体(CH)、固城湖群体(GCH)、洪湖群体(HH)、启东长江口群体(WAZ)及鄱阳湖群体(PYH)五个克氏原螯虾野生种群的遗传结构进行分析。统计了各群体的有效等位基因数(Ne)、多态信息含量(PIC)、平均杂合度(Ho)、平均期望杂合度(He)、群体间的遗传系数(DI)及遗传距离(DS)等参数,并采用UPGMA法构建系统发生树。结果表明5个地方种群在5个位点共获得的等位基因数为20个,大小在之间160~290bp。期望杂合度与观测杂合度比较接近。多态信息含量巢湖(CH)最大为0.6925鄱阳湖(PYH)最小为0.6039,聚类分析结果为,五个地方种群可聚为三类,CH与WAZ遗传距离最小,为(0.0576),亲缘关系最近,聚为一类;HH与PYH为一类,GCH独聚为一类。本次研究表明:长江流域克氏原螯虾种群的遗传多样性都处于较高水平且遗传结构有了一定的分化,提示该物种具有较大的选育空间。
试验二不同饵料组分对克氏原螯虾生长及免疫的影响
2.1饵料不同蛋白水平对克氏原螯虾生长和免疫的影响
本研究按等能量不等蛋白的原则,以鱼粉、豆粞等为主要蛋白来源,设置蛋白质水平为5%、15%、25%、35%、45%的5组试验饲料,每组试验设3个重复,每个重复放养克氏原螯虾,平均初重0.023g。每天投喂2次,试验共进行30 d,研究配合饲料中不同的蛋白质水平对克氏原螯虾生长及免疫的影响。通过增重率、饲料系数、胃蛋白酶活力及肌肉中过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)及碱性磷酸酶(AKP)活力等指标的测定来评估不同蛋白水平对克氏原螯虾生长、消化及免疫的影响。
以增重率为生长指标拟合出方程为抛物线函数:y=-94.607x2+77.995x+1.1114(R2=0.9038),并进行函数解析得当蛋白水平为41.22%,增重率最大。以饲料系数为指标拟合出方程为抛物线函数:y=7.0714 x2-6.1457x+3.487(R2=0.882),解析函数可得蛋白水平为43.45%,饲料系数最小。胃中胃蛋白酶活力随蛋白质含量的增加而升高,当蛋白质水平高于35%时,酶活性下降。胃蛋白酶活力与增重率变化趋势相同,提示了消化与生长具有一定的相关性。饲料中不同蛋白水平对ACP、SOD、POD等活力无显著性影响(P>0.05),但对AKP活性有显著性影响(P<0.05)。
2.2不同虫草多糖添加量对克氏原螯虾生长和免疫的影响
在克氏原螯虾基础饲料中分别加添加质量比为0.2‰、1‰、1.8‰、2.6‰及3.4‰的虫草多糖,各组饵料的蛋白含量均为35%,其中对照组投喂的饵料不添加虫草多糖,30 d后,通过增重率、饲料系数、胃蛋白酶活力及肌肉中过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)及碱性磷酸酶(AKP)活力等指标来评估不同虫草多糖添加量对克氏原螯虾生长、消化及免疫的影响。
结果如下:虫草多糖对克氏原螯虾具有促进生长的作用。当虫草含量达到2.6‰时实验末体重最重、增重率最大,高于该剂量时随多糖含量的增加增重率并不再显著增加。当虫草含量在0.2‰时,免疫活力与对照组相比差异性不显著,其临界下限应大于0.2‰。当虫草含量在1‰含量时,免疫活性与对照组相比显著增加(P<0.05),但含量超过该剂量时免疫活性并不再显著增加,虫草多糖含量增强免疫活性添加剂量的临界上限值≤1‰。