eIF3p170和细胞周期调控因子在小鼠发育期心肌细胞中的表达变化研究

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目的:探讨真核生物起始因子3p170(eukaryotic initiation factor3p170, eIF3p170)在小鼠发育心肌细胞中的表达及其与细胞周期调控因子细胞分裂周期基因2(cell division cycle2, cdc2)、细胞周期素D1(CyclinD1)和细胞周期素B1(CyclinB1)之间的相关关系。方法:取胚胎第13、15、18及生后第1、2、3、5、10、15、20、30天小鼠心肌细胞,用RT-PCR从mRNA水平观察eIF3P170、cdc2、 CyclinD1和CyclinB1这些调控子在不同时间点的表达及eIF3P170与cdc2、CyclinD1和CyclinB1表达之问的关系。取胚胎第15、18及生后第1、2、3、5天小鼠心肌细胞,用Western-blotting从蛋白水平观察cdc2、CyclinD1和CyclinB1这些调控子在不同时间点表达的变化。结果:1.通过RT-PCR检测显示:eIF3P170、cdc2mRNA的表达在胚胎第13、15、18及生后第1、2、3、5天的表达均较强,在生后第5天表达达到最强(P5与各时间点比较P<0.05),而后表达逐渐减弱,在生后第30天的表达降至最弱(P30与各时间点比较P<0.05)。CyclinD1mRNA的表达在胚胎第13、15、18及生后第1、2、3、5天的表达均较强,在生后第5天表达达到最强(P5与P30之间比较有统计学意义P<0.05,与其余各时间点比较无统计学意义P>0.05),而后表达逐渐减弱,在生后第30天的表达降至最弱,有统计学意义(P30与各时间点比较P<0.05)。CyclinB1mRNA的表达在胚胎第13、15、18及生后第1、2、3、5天的表达均较强,而后无明显减弱,统计学分析无明显差异(P>0.05)。2.通过直线相关性分析发现eIF3P170与cdc2、CyclinD1和CyclinB1mRNA表达之间具有正相关关系。3.cdc2蛋白在胚胎第15、18天表达较强,出生第1天后表达减弱(P<0.05); CyclinD1蛋白在胚胎期及出生早期表达较强,在生后第5天表达减弱(P<0.05);CyclinB1蛋白表达在生后第5天出现增强(P<0.05)。结论:1.小鼠心肌细胞eIF3P170、cdc2、CyclinD1和CyclinB1mRNA的表达在胚胎期及出生早期均较强,在生后第5天达到最强,之后逐渐下降。小鼠心肌细胞cdc2蛋白在胚胎期表达较强,出生后第1天始表达下降;CyclinD1蛋白在胚胎期和新生儿早期表达较强,生后第5天表达下降;CyclinB1蛋白表达在生后第5天出现增强。2.eIF3P170mRNA的表达与cdc2、CyclinD1和CyclinB1mRNA表达呈正相关。3.eIF3P170、cdc2、CyclinD1和CyclinB1可能参与心肌细胞退出细胞周期。
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