目的:通过构建体外细胞模型,探明米诺环素对氧化应激诱导角质形成细胞CXCL16产生的作用及机制;扩展和深化对米诺环素药理作用机制的认识,为今后进一步开发及应用米诺环素作为白癜风类疾病的治疗新手段提供坚实的理论依据。方法:体外建立细胞模型。人角质形成细胞系（HaCat）培养在含有10%FBS的DMEM培养基中。不同浓度的H₂O₂（125、250、500、1000、10000 uM）;不同浓度的米诺环素（125、250、500、1000 uM）;1000 uM H₂O₂+米诺环素（500、1000 uM）作用于HaCat细胞;PBS处理组作为空白对照组。处理后各组用CCK8法测试细胞活力。趋化因子芯片检测确定试验的细胞因子。提取总RNA,依此为模版逆转录为cDNA,再应用实时QRT-PCR检测细胞因子CXCL16 mRNA的表达水平进行检测。收集上述各组细胞培养上清,用ELISA检测细胞释放趋化因子CXCL16水平。Transwell趋化实验和流式细胞术检测上述各处理组细胞上清对外周血PBMC CD8⁺T细胞的趋化作用。WB检测HaCat细胞通路eIF2a,NF-κB的磷酸化表达。结果:CCK8法测试细胞活力。趋化因子芯片检测结果发现,与空白对照组相比,H₂O₂作用于HaCat细胞后,CXCL16释放增加;而经过米诺环素处理后CXCL16的表达明显降低,由此试验选择变化最明显的细胞因子CXCL16。与H₂O₂阳性对照组相比,经H₂O₂（1000 uM）和米诺环素（500、1000 uM）干预组处理HaCat细胞后,QRT-PCR和ELISA检测结果示细胞因子CXCL16的表达明显降低,transwell趋化实验和流式细胞仪检测对外周血CD8⁺T细胞的趋化作用明显下降;WB检测显示,米诺环素明显抑制eIF2a、NF-κB的磷酸化表达。结论:1.在氧化应激诱导下,e IF2a信号通路激活NF-κB参与人角质形成细胞中CXCL16的产生,后者驱使毒性CD8⁺T细胞浸润黑色素细胞周围并导致损伤。通过我们的试验发现米诺环素可通过抑制此信号通路的激活,从来达到降低角质形成细胞的氧化应激,使黑色素细胞减少受损。2.本研究为了解米诺环素治疗白癜风患者的有益作用的分子机制提供深入的见解。我们的研究表明米诺环素可能是预防黑素细胞损失和促进白癜风患者再色素化的有前景的药物。