【摘 要】
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该文借助公共ESTs数据库,利用NCBI中的电子差异展示(digital differential display,DDD)软件,从筛查人类睾丸中有高表达而在其他组织中不表达或低表达的差异ESTs入手,成功克
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该文借助公共ESTs数据库,利用NCBI中的电子差异展示(digital differential display,DDD)软件,从筛查人类睾丸中有高表达而在其他组织中不表达或低表达的差异ESTs入手,成功克隆到一个在人类睾丸中高表达的新基因SPATA11,并对该基因的功能进行了初步研究.第一章利用电子差异展示方法获得睾丸组织高表达基因谱,经过统计学分析,获得两组文库间有统计学意义的差异表达基因共473个,其中在非睾丸组织来源EST文库中高表达的有110个,余下的363个在睾丸组织来源EST文库中高表达.在睾丸文库中高表达的EST中有132个为已知基因,按其功能可以归于酶、受体/膜表面分子、结合蛋白、分泌蛋白等,余下的可能代表新基因.第二章SPATA11基因的克隆与序列生物信息学分析,生物信息学分析显示SPATA11基因定位在19p13.3,由4个外显子和3个内含子所组成,基因组跨越2.6kb,编码221个氨基酸,分子量约为24.5kD,与已知蛋白质无明显同源性.SPATA11蛋白最大可能是一种胞浆蛋白(47.8％).在SPATA11基因的5′端和第一外显子内存在1个CpG岛,位于-88到+593bp,共681 bp,其GC含量为62.1％.第三章SPATA11基因功能的初步研究RT-PCR显示SPATA11基因在98天、4+月、5+月胚胎睾丸组织中表达量维持在较低水平,8+月胚胎睾丸组织中表达量开始上升,到成人阶段达到最高,同时SPATA11基因在胚胎干细胞中也有较高水平的表达.
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