促红细胞生成素对大鼠脊髓损伤后影响研究

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第一部分促红细胞生成素对大鼠脊髓损伤后研究目的探讨促红细胞生成素对大鼠脊髓损伤后凋亡蛋白P53表达的研究。方法将44只成年SD雄性大鼠随机分为假手术组A(n=4)、对照组B(n=20)、实验组C(n=20),A组咬除椎板不损伤脊髓,B、C组按改良Allen打击法建立大鼠脊髓损伤模型;C组术后3h腹腔注射EPO(1000IU/kg),A、B两组术后3h腹腔注射等计量生理盐水。通过Tarlov评分评价(6h、1d、3d、7d)点每组大鼠神经功能恢复情况;后取大鼠脊髓损伤组织做免疫组化染色检测P53阳性细胞的表达,来比较分析两组的差别。结果对照组各时间点的Tariov评分与假手术组、实验组差别有显著性意义(P<0.05)。对照组、实验组6h出现P53表达,后不同程度的凋亡增加,3d达到高峰,7d减少。实验组P53表达各时间点明显少于对照组(p<0.05),Tarlov评分与P53细胞凋亡有关,相关系数r=-0.5290,差别有显著性意义(P=0.016<0.05)。结论脊髓损伤后能诱导P53表达;Tarlov神经功能评分降低与P53表达升高有关;促红细胞生成素能降低P53表达,对脊髓损伤有保护作用。第二部分不同时间应用促红细胞生成素对大鼠脊髓损伤后研究目的观察不同时间应用重组促红细胞生成素(rHu-EPO)对大鼠脊髓损伤(SCI)后运动功能的改善及病理学的变化,为临床应用促红细胞生成素保护脊髓功能提供更多的理论指导。方法64只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组A(n=4)、对照组B(n=20)、EPO防治组C(n=20)、EPO治疗组D(n=20),A组咬除椎板不损伤脊髓,B、C、D组采用改良Allen法建立脊髓损伤模型,C组术前3h腹腔注射EPO(1000IU/kg),D组术后3h腹腔注射EPO(1000IU/kg),A、B两组注射等计量生理盐水。各组术后6h、1d、3d、7d四个时间点通过BBB评分和斜板实验对大鼠后肢神经功能恢复情况进行评价,后取大鼠脊髓损伤处行HE染色,观察各组病理学变化。结果运动学评分:EPO防治组C、治疗组D各时间点明显优于对照损伤组B(P<0.05);6h时间点C、D组中,运动学评分没有显著性差异(P>0.05);在1d、3d、7d时间点C、D组中,运动学评分有明显差异,有统计学意义(P<0.05)。病理学:A组脊髓灰白质结构清晰,神经元丰富;B组脊髓损伤出出血、坏死,结构紊乱,并逐渐加重;D组较B组损伤轻,后结构逐渐清晰。C组较B、D组损伤轻,出血少,细胞肿胀轻微,后肿胀基本消退。结论EPO能促进神经运动功能的恢复,对大鼠脊髓损伤后具有保护作用;EPO防治组与治疗组6h疗效一致。在1d、3d、7d时间点,EPO预防治疗组效果更好,术前3h开始应用EPO较术后效果更好。
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