论文部分内容阅读
目的:本实验通过建立常温体外循环模型,观察磷酸肌酸钠对于体外循环脑损伤的脑保护作用,为进一步探讨磷酸肌酸钠的脑保护机制提供实验基础,并为临床应用提供依据及更多客观的参考指标。方法:将18只成年雄性Sprague-Dawley大鼠随机分成三组,分别为假手术对照组(Sham组,n=6),磷酸肌酸钠体外循环组(PCr组,n=6),体外循环组(CPB组,n=6),三组大鼠采用10%水合氯醛,350 mg·kg-1腹腔注射麻醉,经口气管插管后接呼吸机进行机械通气,经右侧上腔静脉、右侧颈内动脉、股动脉、股静脉穿刺置管,250U·kg-1肝素抗凝。PCr组及CPB组采用常温(37±0.5℃)体外循环,总转流时间为60min,经右侧上腔静脉插管行右心房引流,右颈内动脉作为血液灌注管,灌注流量为(120~150)m L·kg-1·min-1;Sham组除了不进行体外循环外,其余操作与CPB组相同;PCr组在CPB组的基础上,在预充液中加入磷酸肌酸钠100mg/kg进行体外循环;实验过程中检测体温、动脉压、动脉血气。用ELISA法于体外循环前、CPB结束即刻、结束后20分钟,采集血标本,检测大鼠血清s-100β蛋白浓度,并于体外循环前、CPB结束即刻、结束后2h测特异性神经元烯醇化酶NSE酶浓度水平。CPB结束后6h时心脏灌注4%多聚甲醛固定,取脑组织标本,通过光学显微镜观察大脑海马组织超微结构变化。结果:CPB组和Pcr组转流中平均动脉压、心率、体重无统计学意义(p>0.05)。海马HE染色显示:Sham组细胞数量、形态及结构正常,核仁清楚,未见明显病理异常;与Sham组比较,CPB组大鼠大脑皮层细胞核核膜模糊,核内异染色质边集凝聚,细胞器有减少,出现空泡化,细胞间紧密连接相对松散;Pcr组大鼠海马组织超微结构的病理改变较CPB组明显减轻,与Sham组比较,PCr组中的神经细胞凋亡增多。S-100β蛋白浓度大鼠组内比较:Sham组三个时间点的蛋白浓度几乎没有变化,p>0.05,也证明此组蛋白浓度没有统计学意义;PCr组同CPB组术后较术前浓度明显升高,且p<0.05,说明CPB过程造成了S-100β升高。大鼠组间比较:术前三组蛋白浓度两两比较,p>0.05,说明术前各组S-100β无差别。术后即刻同术后20分钟,PCr组与CPB组的蛋白浓度与Sham组比较,蛋白浓度明显升高,但PCr组的蛋白浓度升高程度低于CPB组,说明PCr有减轻脑损伤的作用。NSE酶浓度大鼠组内比较:Sham组三个时间点的酶浓度几乎没有变化,p>0.05,也证明此组蛋白浓度没有统计学意义;PCr组同CPB组术后较术前浓度明显升高,且p<0.05,说明CPB造成了脑损伤,术后两个时间点的酶浓度p<0.05,说明术后两个时间点的酶浓度的变化没有改变。大鼠组间比较:术前三组酶浓度两两比较,P>0.05,无统计学意义,术后即刻同术后20分钟测得的蛋白浓度各时间点两两比较,P<0.05,说明CPB造成了脑损伤,而PCr能减轻脑损伤。结论:1、体外循环可以导致大鼠的S-100β蛋白及NSE表达增加;2、CP能减轻体外循环导致的S-100β蛋白及NSE表达增加,减轻体外循环所带来的脑损伤。