论文部分内容阅读
肿瘤细胞常对各种死亡诱导作用高度耐受,为增强抗癌药物效应并减少药物毒副作用,选择不同作用机制抗癌药物联合已成为临床肿瘤治疗的一种常用策略。他汀(Statins)是MVA代谢途径限速酶HMGCR抑制剂,包括发酵生成的天然Statins与人工合成两类。Statins是临床常用降胆固醇药物。肿瘤细胞常存在MVA代谢途径异常,因此Statins可通过抑制肿瘤细胞MVA生成并产生选择性抗肿瘤效应,是一类潜在抗癌药物。丙戊酸(Valproic acid,VPA)为临床常用抗癫痫药物。作为一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂,VPA具有抗肿瘤效应,也是一种潜在抗肿瘤药物。本文首先观察天然来源Simvastatin和人工合成Fluvastatin各自体外抗急性髓性白血病(Acute myeloid leukemia,AML)效应;然后观察Simvastatin和Fluvastatin分别联合VPA体外协同抗AML效应;最后观察可达血药浓度的Fluvastatin联合VPA诱导U937凋亡的生化机制。 方法: 第1章: 1.用选定浓度的Simvastatin和Fluvastatin分别作用人AML细胞系U937和HL-6096小时,MTT法检测细胞存活率。 2.用选定浓度的Simvastatin和Fluvastatin分别作用人AML细胞系U937和HL-6096小时,流式细胞术检测Sub-G1细胞群(即凋亡细胞群)。 3.用选定浓度的Simvastatin和Fluvastatin分别作用人AML细胞系U937和HL-6096小时,倒置显微镜观察细胞形态学改变。 第2章: 1.用选定浓度的Simvastatin和Fluvastatin分别与选定浓度VPA单独或联合作用U937、HL-60和HL-60/ADR72小时,MTT法测定细胞增殖抑制率,采用Chou-Talalay联合指数法分析两药合用功效。 2.用选定浓度的Fluvastatin与选定浓度VPA单独或联合作用U937、HL-60和HL-60/ADR72小时,流式细胞术检测Sub-G1群即凋亡细胞群。 第3章: 1.用选定浓度的Fluvastatin和VPA单独或联合作用U93772小时,提取细胞总蛋白,Western blot检测PARP、Procaspases-3、9、8剪切片段。 2.用选定浓度的Fluvastatin和VPA单独或联合作用U93772小时,提取细胞总蛋白,Western blot检测Bcl-2、Bcl-xL、Mcl-1蛋白表达。 结果: 第1章: 1.Simvastatin和Fluvastatin对U937增殖抑制作用均强于HL-60。 2.Simvastatin和Fluvastatin诱导U937细胞凋亡比例均明显高于HL-60。 3.Simvastatin和Fluvastatin诱导U937死亡的形态学改变均较HL-60明显。 第2章: 1.Simvastatin和Fluvastatin分别联合VPA可协同抑制U937、HL-60和HL-60/ADR细胞增殖。 2.Fluvastatin分别联合VPA可协同致U937、HL-60和HL-60/ADR细胞凋亡比例增加。 第3章: 1.Fluvastatin联合VPA可诱导U937细胞中PARP、Procaspases-3、9形成明显剪切片段。 2.Fluvastatin联合VPA可诱导U937细胞Bcl-xL、Mcl-1表达明显下降。 结论: 1.Statins具有选择性抗AML效应。 2.Statins联合VPA在体外可通过诱导细胞凋亡产生协同抗AML效应。