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目的: 观察不同灸法对溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)模型大鼠结肠黏膜水通道蛋白及紧密连接相关蛋白的影响,探讨艾灸治疗溃疡性结肠炎的作用机制,为灸法治疗UC提供科学依据。 方法: 按照随机分配方法,对42只SD大鼠进行分配,分成正常组9只和造模组33只。对造模组大鼠采取免疫学方法结合结肠局部刺激制备实验性UC大鼠模型。造模完成后在正常组中和造模组中各随机抽取大鼠1只进行模型鉴定。将剩下的造模大鼠随机分为模型组、隔药灸组、隔姜灸组和西药组四组,每组8只。隔药灸组与隔姜灸组均选取天枢穴(双)、大肠俞穴(双),进行隔药灸或隔姜灸干预,均每日1次,每次2壮,共治疗10天。西药组选用柳氮磺胺吡啶(SASP)溶液灌胃治疗共10天。干预结束后,观察大鼠一般情况,采用HE染色,光镜下观察结肠黏膜组织损伤程度,采用免疫组织化学SP法检测结肠黏膜组织ZO-1,claudin-1、-2、-3、-4、-12、-18a和AQP4,AQP8蛋白表达。 结果: 1.一般情况观察:与正常组比较,模型组大鼠活动迟缓,皮毛稀疏,体重增长缓慢,进食减少,易惊,肛周有粪便沾染,大便稀黄腥臭,或粘液血便。与模型组比较,西药组与隔药灸组、隔姜灸组大鼠一般情况均有不同程度改善。 2.结肠组织病理学损伤:与正常组比较,模型组大鼠结肠黏膜形态不完整,结构遭到破坏,上皮缺损、脱落,可见溃疡形成,腺体结构遭到破坏,黏膜及黏膜下层存在大量炎性细胞浸润,间质有明显充血水肿;与模型组比较,隔药饼灸组及隔姜灸组大鼠黏膜结构较为完整,炎性细胞较少,未见严重黏膜层炎性浸润,腺体较模型组排列规则;西药组大鼠上皮结构有些许破坏,黏膜层存在较少炎性细胞浸润。模型组大鼠结肠黏膜组织损伤评分较正常组明显增高(P<0.05);隔药灸组、隔姜灸组以及西药组结肠组织损伤评分显著低于模型组(P<0.05)。 3.结肠ZO-1,claudin-1、-2、-3、-4、-12、-18a蛋白的表达:与正常组比较,模型组大鼠结肠黏膜ZO-1蛋白表达显著下降(P<0.01,)claudin-1、-4、-12蛋白表达显著下降(P<0.05),claudin-2蛋白表达明显升高(P<0.05),claudin-18a蛋白表达显著增高(P<0.01);与模型组比较,隔药灸组、隔姜灸组大鼠结肠黏膜ZO-1蛋白表达显著增高(P<0.01),claudin-2蛋白表达显著下降(P<0.05, P<0.01),隔药灸组claudin-4蛋白显著升高(P<0.01),隔姜灸组claudin-12蛋白显著升高(P<0.05),隔药灸组、隔姜灸组大鼠结肠黏膜claudin-18a蛋白显著下降(P<0.01),西药组大鼠结肠黏膜ZO-1,claudin-4、-12蛋白表达明显升高(P<0.05),结肠claudin-18a蛋白表达显著降低(P<0.01),结肠claudin-2蛋白表达显著下降(P<0.05)。claudin-3蛋白在各组之间表达均无差异(P>0.05)。 4.结肠AQP4、AQP8蛋白的表达:与正常组比较,模型组大鼠结肠黏膜AQP4、AQP8蛋白表达显著下降(P<0.01);与模型组比较,隔药灸组、隔姜灸组大鼠结肠黏膜AQP4蛋白表达显著升高(P<0.05),AQP8蛋白表达显著升高(P<0.01,P<0.05),西药组大鼠结肠黏膜AQP4、AQP8蛋白表达显著升高(P<0.05)。 结论: 1.隔药灸和隔姜灸可明显改善UC大鼠结肠黏膜损伤; 2.隔药灸能上调UC大鼠结肠黏膜ZO-1、claudin-4的蛋白表达,下调claudin-2、claudin-18a的蛋白表达;隔姜灸能上调UC大鼠结肠黏膜ZO-1、claudin-12的蛋白表达,下调claudin-2、claudin-18a的蛋白表达; 3.隔药灸和隔姜灸均可上调UC大鼠结肠黏膜AQP4、AQP8的蛋白表达。