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脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON),又名呕吐毒素,是目前全球谷物污染最严重的真菌毒素之一。在所有的易感动物中,以猪最为敏感。本研究采用DON标准品,通过静脉注射的途径,研究该毒素在猪体内器官组织的分布情况,为毒素的残留提供依据。
本研究选用15头健康阉公猪,随机分为三组。两组经乳静脉注射DON,染毒剂量分别为25μg/kg b.w.和75μg/kg b.w.,另一组静注生理盐水。注射完成后开始计时,并观察记录猪的反应情况,待30min后采血一次,之后放血宰杀,并迅速取材,一个组织样取两份。一份组织样和之前所取的血样用高效液相和质谱联用的方法来检测DON的浓度,另一份组织样经固定,冲水,脱水,包埋等一系列步骤后,制成5μm厚的石蜡切片。之后,采用免疫组织化学染色结合光学显微镜观察等方法,对DON在猪体内组织的定位分布情况进行研究。
研究结果显示,染毒剂量75μg/kg b.w.组,静注后约5-10min,开始出现明显的异常反应。具体表现为:狂躁不安,不停的磨牙,咀嚼,之后大量流涎,随之出现呕吐等症状,这一过程的持续时间对该组猪来说有个体差异。而251μg/kg b.w.组,从静注完成开始计时,30min内未出现任何肉眼可观察到的异常反应情况。
高效液相和质谱联用测定结果表明,静注后30min,血浆中DON的浓度可以达到较高的水平。75μg/kg b.w.组,平均达到75.40ng/mL;25μg/kg b.w.组,平均达到23.42 ng/mL.
免疫组织化学染色定位结果显示,在所取的26个组织样品中,有11个组织呈现阳性反应。具体分布情况是:在延髓中的血管壁周围、扁桃体中的血管壁、肾上腺髓质中央静脉的血管壁及其周围、甲状腺外围结缔组织中的血管周围以及甲状腺滤泡、胃底部粘膜表面单层柱状上皮层和贲门部固有层内的贲门腺的内侧、十二指肠肠绒毛、空肠的粘膜层、肾脏中的肾小管和肾小囊壁层、肝脏中的门管区(小叶间静脉)、脾脏的中央动脉管壁、肠系膜淋巴结的血管壁均可见有DON分布,剩余的其它15个组织呈现阴性反应.