基于炎性分化调节通路TRAF6/NF-κBp65/NFATc1探讨瑞香素治疗绝经后骨质疏松的作用机理

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目的:在建立绝经后骨质疏松动物模型的基础上,基于炎性相关因子调节通路TRAF6/NF-κBp65/NFATc1,同时采用与炎症和骨代谢相关的因子作为观察指标,探讨瑞香素治疗绝经后骨质疏松的作用机理,为瑞香素防治骨质疏松提供实验依据。方法:60只3月龄雌性SD大鼠,随机分为:瑞香素低(A组)、中(B组)、高剂量组(C组),阳性对照组(D组)、模型组(E组)、空白组(K组),每组10只,除空白组外均进行去卵巢造模。造模成功后低、中、高剂量组分别予以瑞香素35mg/kg·d、70mg/kg·d、140mg/kg·d灌胃,阳性对照组予以阿仑膦酸钠灌胃7.3mg/kg·周,模型组予以生理盐水70mg/kg·d灌胃,空白组不治疗,连续灌胃12周后,采用双能X线检测大鼠骨密度,运用Elisa对检测大鼠血清中Ca、P、ALP、IL-6、TNF-α、PICP、CTX1、PTH的表达。WB检测TRAF6、NF-κBp65、NFATc1蛋白表达,RT-PCR分析TRAF6、NF-κBp65、NFATc1基因的表达。结果:1.双能X结果显示:给药12周以后中剂量、高剂量、阳性对照组、空白组的骨密度均高于模型组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。2.Elisa结果显示:低、高剂量组IL-6含量均低于模型组,且差异具有统计学意义(P<0.05);低剂量、高剂量TNF-α的含量均低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。高剂量组Ca含量高于阳性对照组和模型组,差异具有统计学意义(P<0.05);低、中、高剂量组P含量均高于模型组、空白组,低于阳性对照组,且差异具有统计学意义(P<0.05);中、高剂量组ALP含量均低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。低、中、高剂量组PICP的含量高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05);低剂量组CTX1含量与阳性对照组、模型组、空白组相比差异具有统计学意义(P<0.05),中剂量组CTX1含量与阳性对照组和空白组相比差异具有统计学意义(P<0.05);低、高剂量组PTH含量与模型组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。3.Western blot结果显示:低、中剂量组TRAF6蛋白含量低于阳性对照组、模型组和空白组,且差异与其相比具有统计学意义(P<0.05);高剂量组TRAF6蛋白含量与模型组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。低、中剂量组NF-κBp65蛋白含量均低于阳性对照组、模型组和空白组,且差异具有统计学意义(P<0.05);高剂量组NF-κBp65蛋白含量低于模型组,与阳性对照组和模型组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。低、中剂量组NFATc1蛋白含量与阳性对照组、模型组、空白组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。4.RT-PCR结果显示:低、中、高剂量组的TRAF6、NF-κBp65、NFATc1基因表达量均与模型组、空白组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.瑞香素可降低骨质疏松大鼠的血清IL-6、TNF-α炎性因子的表达。2.瑞香素通过抑制骨质疏松大鼠骨吸收因子CTX1、ALP和升高骨形成因子PICP达到改善骨代谢,缓解骨质疏松的进程。3.瑞香素可通过抑制TRAF6/NF-κBp65/NFATc1通路蛋白和基因的表达,抑制大鼠体内炎症反应和破骨细胞的活化,从而抑制骨吸收,达到改善骨代谢,发挥抗骨质疏松的作用。表明瑞香素可能是绝经后骨质疏松治疗的潜在选择的新药物。
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