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第一部分南美响尾蛇神经毒素对人肺腺癌A549细胞体外生长抑制作用及其相关机制目的观察南美响尾蛇神经毒素(Crotoxin)体外抗肿瘤作用,并探讨其相关机制。方法以人肺腺癌A549细胞(野生型P53,wild-typeP53,wtP53)为实验对象。通过四氮唑盐还原法(MTT)、细胞集落平板克隆实验观察Crotoxin及其与吉非替尼(Gefitinib,Iressa)联合应用对人肺腺癌A549细胞的生长抑制作用;应用流式细胞术检测Crotoxin对人肺腺癌A549细胞凋亡率、细胞周期的影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定Crotoxin作用后人肺腺癌A549细胞内wtP53、caspase3活性亚单位P17、phospho-P38MAPK蛋白表达水平,并以SB203580(吡啶咪唑化合物,P38信号转导通路特异性抑制剂)抑制P38MAPK活性后观察Crotoxin对人肺腺癌A549细胞的影响。结果Crotoxin对人肺腺癌A549细胞有生长抑制作用,与Iressa联用可增强Iressa抗肿瘤效果(P<0.05);Crotoxin对人肺腺癌A549细胞有诱导凋亡和细胞周期G1期阻滞作用,可引起A549细胞胞内wtP53、caspase3活性亚单位P17、phospho-P38MAPK蛋白表达上调,以SB203580抑制P38MAPK活性后,Crotoxin对A549细胞诱导凋亡作用基本消失,无caspase3活性亚单位P17表达上调,但G1期阻滞作用无明显变化,仍有wtP53表达上调。结论Crotoxin对人肺腺癌A549细胞体外生长有抑制作用,其作用与诱导凋亡和G1期阻滞有关,其中诱导凋亡作用可能和激活P38MAPK信号转导通路进而活化Caspase3有关,G1期阻滞可能由胞内wtP53蛋白表达上调所致。第二部分南美响尾蛇神经毒素对人肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长抑制作用目的观察南美响尾蛇神经毒素(Crotoxin)对人肺腺癌A549细胞(wtP53)裸鼠移植瘤生长抑制作用,及Crotoxin对移植瘤组织微血管生成的影响。方法接种人肺腺癌A549细胞建立裸鼠移植瘤模型,分对照组和Crotoxin组,给药四周后(Crotoxin10μg/kg生理盐水稀释后腹腔注射2次/周)比较移植瘤瘤重,计算抑瘤率;免疫组化法测定移植瘤微血管密度(microvessd density,MVD);电镜观察移植瘤微血管内皮改变。结果Crotoxin对人肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长有抑制作用,抑瘤率为36.3%;免疫组化MVD计数Crotoxin组(13.56±3.27)较对照组(34.29±8.64)明显减少,差异有统计学意义(P<0.05);电镜观察Crotoxin组移植瘤微血管数量较对照组明显减少,微血管内皮细胞结构有不同程度损害。结论Crotoxin对人肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤有生长抑制作用,可减少移植瘤组织微血管生成。