本研究采用普通大豆(RSB)、脱脂豆粕(DFSB)和脱脂去皮豆粕(DHSB)为原料,通过不同工艺和酶解体系筛选制备大豆肽,并对制备的大豆肽进行成分分析和评价,筛选出一种制品用于动物实验,比较自制大豆肽与市售大豆肽对广东新兴黄羽5号肉仔鸡的作用,确定出适宜添加量。 选用RSB、DFSB和DHSB三种样品分别与水以1:4、1:5和1:6(质量体积比)的比例制备蛋白提取溶液.将胃蛋白酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶组合成酶体系,在不同的pH(2.0、2.5、7.5、8.0、8.5和9.0)和温度(37℃和42.5℃)条件下对冻干提取物进行酶解以获得潜在的含有144个氨基酸的肽段.所有的样品和对照用的多肽(大豆寡聚肽MSBP,购自广州)一起进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳.运用大的蛋白标准物后,对照蛋白(MSBP)和F4、F8、F40、A13、A40、H4、H8、H12、H24、H36、H40、H44和H48都未监测到蛋白带的分离.运用小的蛋白标准物后,H8监测到相似分子量的蛋白肽段的分离并且其分子量与MSBP相似而与其它的不同.这些蛋白肽的氨基酸分析结果也证明了其与H8和MSBP的相似性. 优化酶联合体系以获得饲养试验所需的大量H8多肽,用于衡量提取物的有效性.脱脂去皮豆粕(DHSB)以1:4的比例溶于水,用于生产H8的蛋白提取物。 物理化学参数和蛋白提取物的百分含量表明,对于同一种蛋白来源,随着蛋白和水制成的蛋白原液中水的比例的逐渐增加(1:4、1:5和1:6),所获得的粗蛋白含量逐渐增加.对于蛋白提取物的百分含量表明,大豆RSB在各种蛋白原液中获得的蛋白提取物量都较多.RSB,DFSB和DHSB的不同的样品与水的对比混合原液中氨基酸含量的分析及化学分析说明,除了DFSB-1:4外,其他样品中甲硫氨酸(Met)和半胱氨酸(Cys)的含量最低.在DFSB-1:4样品中缬氨酸Val(80)是含量最低的氨基酸,接下来是苏氨酸(82)和甲硫氨酸(88). 本研究设计了两个饲养试验来评价H8多肽(本试验中称为LPSP)作为添加剂的作用效果.试验一确定日粮中MSBP的最佳添加量。试验选用1620只雄性黄羽5号肉鸡,分为6个处理组,每个处理6个重复,每个重复45只鸡.处理组A、B、C、D、E分别在基础日粮中添加0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％的MSBP,处理组F为对照组,饲喂基础日粮.饲养实验为期21天,试验结果表明0.1％为最好的添加水平.试验二,基础日粮中梯度添加LPSP,添加量分别为0.05％,0.10％,0.15％和0.20％,试验设两个对照,对照组1为基础料,对照组2在基础料的基础上添加0.10％的MSBp.试验二的肉鸡数量,饲养时间,方法和重复的次数与试验一相同. 饲养试验一结果表明饲料中添加0.1％MSBP(A)和0.4％MSBP(D)的肉鸡增重明显,平均日增重(ADG)及饲料转化率(FCE)均达到显著性水平(P<0.05).对照组血液胆固醇的含量高于其他组.MSBP的添加量高于0.1％会导致LDL含量低进而获得低的LDL:HDL比.血清中总胆固醇的指数,白蛋白和球蛋白的含量在所有的饲养试验中都没有显著差异(P>0.05).试验结果表明提高MSBP在饲料中的含量并不会导致肉鸡血液中ALT、AST和ACP水平的上升(P>0.05).MSBP对IGF和GHR的表达量的影响研究表明,A(0.1％MSBP)和D(0.4％MSBP)组饲喂试验中肉鸡的IGF-1和GHR的水平明显较其他组要高(P<0.05).肝脏中MSBP对于IGF-1的基因表达水平的影响试验证明饲喂试验A组(0.194)中IGF-1的基因表达水平明显高于其他组,D组(0.1669)居第二位,对照组为0.444(P<0.05). 饲养试验二结果表明,添加测试多肽LPSP以及对照2(添加0.1％MSBP),其ADG、总重量、第21天的重量及FCE的水平都较第一组对照组(喂基础饲料)差异显著(P<0.05).IGF-1和GHR基因的表达说明在对照1组(饲喂基础日粮)的饲养试验中的肉鸡血清中的IGF-1含量和肝脏中的IGF-1的表达量非常低(P<0.05).