促红细胞生成素对脊髓缺血再灌注损伤保护作用及其机制的实验研究

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目的:缺血-再灌注损伤(Ischemia-reperfusion injury,I-RI)是一种常见的脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)类型,可引起严重的运动感觉障碍。近年来,其发病率有上升的趋势,引起了众多学者的注意和重视,就脊髓缺血再灌注损伤(Spinal cord ischemia-reperfusion injury,SCIRI)的防治进行了广泛深入的研究。目前研究表明,中枢神经组织缺血-再灌注时,各种原因引起的神经细胞的凋亡或坏死,是其损伤机制的关键环节。如何减少神经元坏死或凋亡,是SCIRI 救治的关键因素之一。针对缺血-再灌注损伤的机理,特别是其引起的神经细胞凋亡或坏死,一些药物被用于SCIRI 的防治,主要包括自由基清除剂、钙离子通道阻滞剂和白细胞粘附抑制剂等,均有一定的效果,但并非十分令人满意。EPO 是一种作用于骨髓造血细胞,促进红系祖细胞增生、分化,最终成熟的内分泌激素,但近年来的研究发现EPO 对中枢神经系统(Central nervous system ,CNS)损伤有很强的保护作用而备受关注,实验证明EPO 在CNS 是一个新的有发展前景的神经保护剂。本实验通过SCIRI 模型,观察外源性rhEPO 损伤脊髓的保护作用,并对其机制进行探讨。方法: 1.建立大鼠SCIRI 模型,应用RT-PCR 和免疫荧光组织化学方法观察损伤脊髓内EPO mRNA 及EPO-R mRNA 的表达情况。2.建立兔SCIRI 模型,并将动物分为A:单纯脊髓损伤组、B:rhEPO 处理组、C:地塞米松处理组、D:正常对照组。采用Jacobs 神经功能评定方法,观察各组动物不同时相点神经功能情况,通过HE 染色及电镜观察各组脊髓组织的改变。3.应用TUNEL 法观察各组动物脊髓的神经细胞凋亡情况。4.采用免疫荧光组织化学方法观察各组动物脊髓的Bcl-2 和Bax 的表达变化情况。结果: 1.大鼠SCIRI 后48h, EPO mRNA 及EPOR mRNA 表达的吸光度比值分别由正
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