【摘 要】
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喹乙醇(Olaquindox,OLA)是一种可通过有机化学方法合成的喹噁啉类抗菌促生长剂,能够促进蛋白质的合成,增加瘦肉的生成率,提高饲料转化率,促进动物生长,也可用于细菌感染性疾
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喹乙醇(Olaquindox,OLA)是一种可通过有机化学方法合成的喹噁啉类抗菌促生长剂,能够促进蛋白质的合成,增加瘦肉的生成率,提高饲料转化率,促进动物生长,也可用于细菌感染性疾病的预防和治疗。然而大量研究表明,过量的喹乙醇会在动物体内滞留,产生多种毒副作用,如蓄积毒性和DNA损伤等。被包括欧盟和我国在内的很多国家所禁用。喹乙醇本身不稳定,在动物体内会发生代谢,而其主要代谢产物3-甲基-喹噁啉-2-羧酸(Methyl-3-quinoxaline-2-carboxylic acid,MQCA)相对稳定,是 WHO/FAO 食品添加剂联合专家委员会(JECFA)认定的喹乙醇残留标识物。随着科学技术的不断进步,仪器制造业的不断发展,喹乙醇及其代谢物的检测方法也在不断地发展优化,灵敏度不断提高,为喹乙醇及其代谢物的监控提供了有效途径。为了建立快速、灵敏的喹乙醇代谢物检测方法,本研究设计合成了多种喹乙醇代谢物半抗原。本实验成功合成了 MQCA的系列半抗原,并对半抗原的合成条件进行了优化,最终确定了最佳合成条件:氯甲酸异丁酯的量为120 μL、3-甲基-喹噁啉-2-羧酸与4-氨基丁酸的摩尔比为1:2.5、活化时间为1 h、反应时间为1 h;分别对半抗原进行了与BSA偶联制备了免疫原,偶联比分别为10.69:1,9.53:1,9.11:1,10.02:1;与OVA偶联制备了包被原,偶联比分别为3.81:1,5.33:1,2.67:1,3.36:1;四种免疫原分别免疫Balb/C小鼠,三免3-5鼠血清效价达到100 000,2-1鼠抑制效果最好,2-3和1-4小鼠次之;选择2-1小鼠取脾与骨髓瘤细胞进行融合,经筛选,4D9孔效果最好,并将其制备成杂交瘤细胞株。
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