【摘 要】
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丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge),作为传统中药在治疗心脑血管等疾病中已得到广泛的应用与开发;另外,作为新一代中草药中的模式植物,丹参基因组测序包括基因功能等研究也正如火
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丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge),作为传统中药在治疗心脑血管等疾病中已得到广泛的应用与开发;另外,作为新一代中草药中的模式植物,丹参基因组测序包括基因功能等研究也正如火如荼地展开。野生丹参资源的日益匮乏,品质的逐步退化,加上市场对丹参原材料的需求不断提高,如何利用科学技术手段解决此类问题成了目前研究的重中之重。
本实验具体做了两部分的工作:
其一,选取丹参酮含量最高的丹参转基因毛状根株系G50(3.55 mg/g)为材料,利用甲基茉莉酸(MJ)、水杨酸(SA)作为诱导子对其进行诱导处理,结果表明丹参转基因毛状根G50在经过MJ诱导处理36h后效果最为明显,丹参酮含量提高了3.19倍(11.33 mg/g)。
其二,选取拟南芥AT5G46900、AT1G22440基因启动子作为前期研究对象,将启动子序列构建于植物表达载体pCAMBIA1301上,进而分别转化拟南芥(农杆菌GV3101介导)与丹参毛状根(发根农杆菌C58C1介导),基因芯片数据预测这2个基因都在拟南芥根部特异表达,半定量实验结果符合芯片预测,另外,根据GUS染色结果,GUS蛋白在拟南芥与丹参毛状根中都有表达。
本研究首次在丹参转基因毛状根株系中添加诱导子处理,并发现甲基茉莉酸的诱导效果最为显著,在提高丹参毛状根中丹参酮含量的研究上又向前推进了一步;另外,成功地克隆了拟南芥AT5G46900、AT1G22440基因的启动子,并在拟南芥与丹参毛状根中都能启动表达,为今后克隆丹参启动子以及功能研究做了实验上的铺垫。
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