硒化苦瓜多糖的制备、分形结构表征和降血糖作用研究

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 9次 | 上传用户:liufendou
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实验室前期的研究中发现,苦瓜多糖(MCP)对糖尿病大鼠和小鼠都有降血糖和缓解病症的作用,并且与其抗氧化活性具有相关性。但是提纯后的苦瓜多糖的溶解性变得较差,并且较差的溶解度限制了苦瓜多糖生物活性的发挥。硒元素是机体必须的微量元素。在糖尿病患者体内,硒元素是相对比较缺乏的一种微量元素。但是硒元素在自然界中的存在形态以无机硒居多,无机硒因其本身携带一些对机体有害的基团,直接补充无机硒显然是不正确的。因此将硒元素结合在本身就有降血糖活性、低毒性、高抗氧化性的苦瓜多糖上,是本课题的研究的重点。本课题以硒元素为修饰剂,利用亚硒酸钠在抗坏血酸的作用下还原出硒单质的原理,制备硒化苦瓜多糖(Se-MCP)。采用红外光谱、拉曼光谱检测硒元素与苦瓜多糖的结合状态;扫描电镜和透射电镜照片观察硒化苦瓜多糖的表面结构。利用糖尿病小鼠模型研究硒化苦瓜多糖的降血糖作用。以下是本课题的主要内容:1.亚硒酸钠在还原剂抗坏血酸的还原作用下还原出硒单质,还原出的硒单质在有多糖存在的情况下会结合在多糖上,即为硒化苦瓜多糖。在反应温度为40℃,反应时间为3小时,苦瓜多糖浓度为0.8mg/ml、亚硒酸钠和抗坏血酸的摩尔比为1:3的情况下可制备出性质稳定的硒化苦瓜多糖。2.苦瓜多糖和硒化苦瓜多糖的红外检测和拉曼光谱表明,从亚硒酸钠还原出的硒单质成功结合在硒多糖表面,引起了某些羧基吸收峰发生位移,表明硒单质是结合在苦瓜多糖表面的羧基集团上。3.对苦瓜多糖和硒化苦瓜多糖的扫描电镜和原子力显微镜照片分析:苦瓜多糖表面存在较多尖锐的突起,结合苦瓜多糖扫描电镜照片分析,苦瓜多糖的表面呈片状堆叠的状态,片状形态的边角尖锐。而从硒化苦瓜多糖原子力显微镜照片可以看出其表面要比苦瓜多糖表面更圆滑,类似于覆盖了一层乳状物质,推测是生成的单质硒结合在苦瓜多糖表面形成乳状表层,这与扫面电镜的结果互相印证,更说明了亚硒酸钠还原出的硒单质成功结合在了苦瓜多糖表面。4.硒化苦瓜多糖在清除羟基自由基和DPPH的能力上明显提高,在清除超氧阴离子的能力上则不及苦瓜多糖。5.在研究硒化苦瓜多糖对糖尿病小鼠的降血糖的作用中发现:中剂量的硒化苦瓜多糖可以显著的降低糖尿比小鼠的血糖;可以提高糖尿病小鼠的INS含量、肝脏SOD、GSH-Px和CAT活性;可以降低糖尿病小鼠肝脏MDA含量;可以很好的控制糖尿病小鼠血清中CHO的含量。高剂量的硒化苦瓜多糖可以控制糖尿病小鼠血清中TG的含量。6.在三组苦瓜多糖-硒灌胃的实验组小鼠肝脏、肾脏的切片实验中表明,经过硒化苦瓜多糖灌胃治疗的糖尿病小鼠在血糖降低的同时,也能很好的保护肝脏和肾脏,中剂量硒化苦瓜多糖对糖尿病小鼠肝脏和肾脏的保护作用更好。综上所述,在糖尿病小鼠的治疗中,硒化苦瓜多糖能够降低血糖,提升抗氧化酶的活性,保护机体主要器官,是一种温和的缓解糖尿病症状的多糖药物。其中,中剂量硒化苦瓜多糖的治疗糖尿病作用效果最好,是具有潜在治疗作用和保护作用的药剂。
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