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目的:确定脑内小胶质细胞是否表达甘露糖受体和清道夫受体,并是否存在不同脑区的表达差异,以便进一步明确小胶质细胞是否分为不同的亚型,不同亚型各自的功能。
方法:采用正常、经侧脑室和经腹腔注射细菌脂多糖(LPS)制作C57小鼠的全脑急性炎症模型,用免疫荧光双标技术对其脑组织冰冻切片染色,激光共聚焦显微镜下观察小胶质细胞(Iba-1阳性)或激活小胶质细胞(OX-6阳性)分别与甘露糖受体(CD206)和清道夫受体(CD204)的共定位,比较皮层、海马、纹状体、黑质和小脑5个脑区小胶质细胞和甘露糖受体共定位比例的差异。
结果:1.正常和急性侧脑室注射引起的炎症8W C57小鼠皮层内部分小胶质细胞(包括Iba-1与OX-6)有甘露糖受体(CD206)表达,CD206阳性小胶质细胞的比例分别是83%和94%;激活小胶质细胞(OX-6)与CD206也有共定位,激活的CD206阳性细胞在皮层、海马、纹状体、黑质和小脑的比例分别是79%、81%、74%、53%和66%,而CD206阳性的激活小胶质细胞比例则是63%、48%、49%、53%和.52%。2.急性侧脑室注射炎症8W C57小鼠皮层内部分小胶质细胞有清道夫受体(CD204)表达,CD204阳性小胶质细胞比例是83%。3.新生48h乳鼠原代磁珠分选获得的小胶质细胞(包括Iba-1与CD11b)能够表达清道夫受体(CD204)和甘露糖受体(CD206)。4.神经元细胞可以表达清道夫受体(CD204)和甘露糖受体(CD206)。
结论:1.脑内静息和激活的小胶质细胞都能够表达甘露糖受体,表达量受炎症因素的影响并在不同脑区存在差异,其中黑质内激活的CD206阳性小胶质细胞的比例明显低于其它脑区;CD206阳性的激活小胶质细胞比例则在海马偏低。2.部分激活的小胶质细胞能表达清道夫受体。3.原代小胶质细胞贴壁培养后能表达清道夫受体和甘露糖受体。4.中枢神经系统内的部分神经元能表达清道夫受体和甘露糖受体。5.中枢神经系统内星形胶质细胞不表达清道夫受体和甘露糖受体。