本文根据广东省奶牛场奶牛乳房炎的流行病学特点，选取广东省三个大型奶牛场采集患乳房炎奶牛的奶样进行细菌分离和鉴定、同时对获得的菌株进行药敏实验，确定广东省三个大型奶牛场奶牛乳房炎的种类、主要致病菌株耐药性特点、初步筛选出对奶牛乳房炎致病菌敏感的药物。应用初步筛选的抗菌药物在奶牛场进行临床分组治疗实验；根据所选药物临床治疗效果，确定适合治疗广东省三个大型奶牛乳房炎的药物复方。应用筛选的复方药物在奶牛场治疗奶牛乳房炎，同时监测不同时间点牛奶中该药物的残留情况，进一步验证所选复方药物治疗奶牛乳房炎的临床应用价值。综合以上实验结果，最终筛选出同时具有细菌敏感性强、抑菌强度大、治疗过程中药物在奶液中残留期短等特性的治疗奶牛乳房炎复方药物，并建立治疗奶牛乳房炎过程中奶液药物残留检测方法。试验结果表明： 1.广东省三个大型奶牛场乳房炎的主要致病菌有乳房链球菌、无乳链球菌、大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、克雷伯氏菌、液化沙雷氏菌、四联球菌、蜡样芽孢杆菌、酵母菌、蜂房哈夫尼亚氏菌和奇形变异菌。其中链球菌、葡萄球菌、大肠杆菌和枯草孢杆菌占的比例最高，达82.4％。 2.临床治疗结果表明，临床治愈率排列顺序为：恩诺沙星-阿米卡星复方制剂(100％)、头孢噻肟-舒巴坦钠(83.33％)、克林霉素(33.33％)、阿莫西林-舒巴坦钠(16.67％)，中药复方的治愈率为0％。 3.本试验采用高效液相色谱法，可以有效分离恩诺沙星和环丙沙星，各组份分离度好，保留时间合理。环丙沙星、恩诺沙星在牛奶中的定量限为0.02μg/mL，相关系数为0.99；恩诺沙星在乳汁中的回收率为97.29％，批间和批内的变异系数分别为2.29％、3.35％，环丙沙星在乳汁中的回收率为97.27％，批间和批内的变异系数分别为2.62％、4.61％。 4.给药乳区12小时后检测不到恩诺沙星，24小时后已检测不到环丙沙星。 5.DelvotestSP试剂检测表明阿米卡星在一个疗程后≥36h的乳药浓度已低于试剂盒规定的残留限量2500μg/mL，牛奶中恩诺沙星和环丙沙星对阿米卡星检测产生的干扰性实验结果显示，恩诺沙星和环丙沙星不会对阿米卡星的检测产生影响，此方法可用于恩诺沙星－阿米卡星复方制剂中的阿米卡星在牛奶中的残留检测。