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目的:检测遗传性高铁血红蛋白血症(hereditary methaemoglobinemia， HM)患者的NADH-细胞色素b5还原酶(NADH-cytochrome b5 reductase， b5R)基因突变类型。探讨变异型引起HM-ⅠI的机制和遗传特点。
方法:1.提取HM-Ⅰ型患者及其父母的外周静脉血，测定高铁血红蛋白(methaemoglobin，MetHb)含量。
2.从患者及其父母和正常人的外周静脉血白细胞中提取b5R基因DNA，应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)扩增NADH-细胞色素b5还原酶基因第2～9外显子(exon)，对PCR产物进行基因序列分析。
结果:1.患者MetHb含量12.3％，患者父母MetHb含量正常。
2.患者一个b5R等位基因第153位密码子(位于第5外显子)发生了GGC→GAC突变，原先的甘氨酸(glycine，G)被天冬氨酸(asparagine，D)替代(G153D)；另一个b5R等位基因第145位密码子(位于第5外显子)发生了CCC→TCC突变，原先的脯氨酸(proline，P)被丝氨酸(serine，S)替代(P145S)。患者父亲为P145S杂合子。患者母亲为G153D杂合子。
结论:
1.证实HM患者b5R基因为P145S/G153D双重杂合子。
2.b5R基因P145S突变为国内首次报道，G153D突变国际上未见报道.
3.推测b5R基因P145S和G153D突变可能通过影响b5R酶稳定性导致症状较轻微的HM-Ⅰ型。