差分脉冲和方波伏安法研究生物素-亲和素固载ssDNA的生物传感器

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:joshua5201314
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生物素.亲和素系统成功地固载了单链DNA探针,与铂电极耦合制成生物传感器。用差分脉冲伏安法(DPV)和方波伏安法(SWV)对此传感器进行了研究,并将其成功地应用于转基因食品的检测。该研究的主要步骤是:首先,将电极抛光,亲和素通过吸附作用修饰在电极表面;然后将ssDNA修饰电极浸入含一定浓度目的基因的2xSSC杂交液中,在恒温下进行杂交;最后,在一定条件下分别用Co(phen)<,3><3+>和Hoechst33258作为指示剂,用差分脉冲伏安法和方波伏安法在+0.5~-0.1V范围内扫描检测,记录杂交前后的峰电流差值。探针DNA为人工合成转基因食品中常有的花椰菜花叶病毒35S启动子(CaMV 35S)和根癌农杆菌终止子(ONS)DNA序列。 本文对该DNA传感器的性能进行了研究,并对含有转基因成分的大豆蛋白样品进行了检测。结果表明:两种指示剂之间无明显差别,DPV法和SWV法均显示出了较高的灵敏度,在pH6.8~7.0,[Co(phen)<,3>]<3+>浓度80μmol/L条件下,杂交前后指示剂峰电流的差值与溶液中互补DNA的浓度有良好的线性关系,DPV法测量起始子的线性范围是8×10<-9>~2.8×10<-8>mol/L,终止子的线性范围是7.2×10<-9>~7.2×10<-8>mol/L;SWV法测量起始子的线性范围是8.5×10<-9>~3.5×10<-8>mol/L,终止子的线性范围是7.2×10<-9>~9×10<-8>8mol/L,用该传感器对转基因大豆蛋白粉进行了测定,结果满意。
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