目的:探讨黄芪甲苷(Astragaloside Ⅳ,AS-Ⅳ)对人内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells,EPCs)分泌血管生长因子的影响,为深入研究AS-Ⅳ调节EPC s介导的血管新生的作用机制奠定基础。方法:取足月健康新生儿脐带血10ml,用密度梯度离心法进行离心分层后获取单个核细胞层,用培养基进行传代培养,当细胞呈现梭形时对细胞进行CD31抗体和DAPI核染鉴定,双阳性者则鉴定为EPCs。将获得的EPCs随机分组,实验组用浓度为100mg/L的AS-Ⅳ溶液干预,对照组用等量的PBS液处理,培养24h后,通过酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测标准孔、空白孔中的血管内皮生长因子a(Vascular endothelial growth factor,VEGFa)、VEGFb、VEGFc、成纤维细胞生长因子(Fibroblast growth factor,FGF)、血管生成素-1(Angiopoietin-1,Ang-1)的OD值,以此绘制标准曲线,最终测得待测样品孔中的OD值,根据标准曲线获得各个血管生长因子浓度。结果:1.培养第7天,经CD31抗体和DAPI核染双阳性鉴定证实成功获取EPCs,所获得的EPCs在光镜下排列紧密,细胞边缘清晰,呈典型集落形态、铺路石样排列,中央细胞呈圆形,周边细胞呈梭形。2.进一步实验发现,实验组人EPC s分泌的血管生长因子VEGF a、VEGF b、VEGF c、FGF、Ang-1的浓度与对照组相比,均明显增高,P﹤0.01,差异有显著统计学意义(分别为t=9.84、t=45.24、t=14.51、t=6.27、t=6.57)。结论:1.用密度梯度离心法可通过新生儿脐带血获得纯度较高的人内皮祖细胞,所获得的内皮祖细胞呈梭形、呈典型集落形态、铺路石样排列。2.100mg/l的AS-Ⅳ可促进内皮祖细胞通过旁分泌作用释放血管生长因子VEGF a、VEGF b、VEGF c、FGF和Ang-1,具有调节EPCs介导血管新生的巨大潜能。