中药贯叶金丝桃是极具开发潜力的天然药物，具有清热解毒、抗菌消炎、消肿止血、利湿止痛等中医功效，以及抗抑郁、抗病毒、抗癌、抗菌、镇痛等药理活性。其化学成分金丝桃素、贯叶金丝桃素、金丝桃苷等被认为是发挥药理活性的主要成分，其中，贯叶金丝桃素被认为是抗抑郁的主要活性成分；金丝桃素在抗病毒和抗肿瘤等方面作用显著；金丝桃苷具有明显的抗炎、止咳、镇痛等作用。这些化学成分被用于相关药物的质量控制和进一步的新药开发，具有重要的研究价值。 贯叶金丝桃活性成分的提取纯化难度很大。虽然贯叶金丝桃中有效成分的活性较高，但在植物中甚至是市售的粗提物中含量都很低，这给活性成分的进一步分离纯化带来很大的困难；另外，贯叶金丝桃素和金丝桃素都属于光敏性、热不稳定物质，在遇光和遇热情况下较易发生变化而氧化及失活，这也是这些成分提取困难，提取物中含量较低的原因之一。目前国内外对贯叶金丝桃分离提取，尤其是精制高纯度单体的研究很少。 本论文采用高速逆流色谱法(HSCCC)分离纯化贯叶金丝桃中的贯叶金丝桃素、贯叶金丝桃素氧化物、金丝桃素、黄酮类物质(包括金丝桃苷和一种未知物质)等五种活性成分，研究内容主要包括以下方面： 1．建立五种成分的HPLC分析方法。对于金丝桃素的分析难度较大，实验时购买了金丝桃素对照品；对于没有对照品的贯叶金丝桃素、黄酮类物质等，主要利用HPLC—DAD、HPLC—MS、UV等方法，最终确定了其HPLC分析方法。所建立五种物质的HPLC分析方法包括等比例洗脱和梯度洗脱方式，用到的试剂主要包括甲醇、乙腈、四氢呋喃、水等。这就为为贯叶金丝桃活性成分分离提取和质量控制提供了基础。 2．建立了贯叶金丝桃的粗提取方法。根据相似相溶原理，选择不同极性的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇溶剂依次对市购粗提物粉末进行提取，通过单因素考察法对萃取法、溶剂加热回流法、溶剂超声提取法进行考察，最后选择了选择最适合的粗提取方法即溶剂超声提取法。 3．分别建立五种成分高纯度单体的 HSCCC 分离纯化方法，包括溶剂体系的筛选、分离条件的选择优化和样品的分离。使用逆流色谱的方法，从石油醚超声提取物A中纯化出贯叶金丝桃素(HF)单体和贯叶金丝桃素氧化产物(HF)单体；从乙酸乙酯超声提取物B中纯化出金丝桃素(HR)单体；从正丁醇超声提取物C中纯化出金丝桃苷(HS)单体和一种未知单体成分(HS—5)单体。 4．对分离所得五种单体成分进行了进一步的结构鉴定，采用了包括紫外可见光谱分析、液质联用分析、核磁共振分析等方法。 5．用已建立的方法制备出一定量高纯度的五种成分单体，以便进一步结构鉴定和进行稳定性研究。 本课题所建立的高速逆流色谱分离纯化贯叶金丝桃活性成分的方法，填补了目前国内外相关领域研究的空白；经国内外文献检索，其中只有金丝桃苷有1篇相关报道，其它成分的HSCCC分离均属首次报道。用高速逆流色谱制备出贯叶金丝桃活性成分的高纯度对照品，即可用于相关产品的质量控制，也可用于药理活性的进一步研究，因此，本课题的研究工作具有一定的学术和实用价值。